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第一章 常规组织病理技术1

第一节 组织与细胞的取材1

一、组织取材1

二、细胞取材及制片2

第二节 固定及常用固定剂2

第三节 组织的脱水、透明、浸蜡和包埋4

第四节 切片4

一、石蜡切片4

二、冷冻切片5

第五节 常用的病理染色技术及其应用5

一、苏木素-伊红染色5

二、常用特殊染色方法及其应用6

第二章 酶组织化学技术15

第一节 酶组织化学反应的方法和基本原理15

一、酶组织化学反应的主要方法和基本原理15

二、酶组织化学反应的影响因素16

第二节 常用的酶组织化学染色方法及其应用17

一、碱性磷酸酶显示法17

二、酸性磷酸酶显示法18

三、三磷酸腺苷酶显示法18

四、琥珀酸脱氢酶显示法20

五、非特异性酯酶显示法20

六、胆碱酯酶显示法22

七、γ-谷氨酰基转肽酶显示法23

第三章 免疫组织化学和细胞化学技术25

第一节 免疫组织化学技术概述25

一、免疫组织化学的发展简史25

二、抗原26

三、抗体26

四、抗体的标记28

五、免疫组织化学主要染色方法的原理31

六、非特异染色的控制和对照36

第二节 组织与细胞标本的取材、处理和抗原修复39

一、取材39

二、固定40

三、包埋42

四、切片43

五、抗原修复43

第三节 免疫荧光组织化学技术48

一、免疫荧光组织化学技术的发展史概述48

二、免疫荧光组织化学的原理48

三、荧光抗体的制备50

四、免疫荧光组织化学染色方法55

五、荧光显微镜检查方法57

六、非特异性染色的消除方法58

七、现状与展望59

第四节 免疫金银标记技术60

一、免疫金技术发展史60

二、溶胶的基本概念61

三、胶体金的制备方法62

四、胶体金的质量鉴定64

五、胶体金标记的准备65

六、光镜免疫金银细胞化学68

七、现状与展望74

第五节 免疫酶组织化学技术77

一、酶标抗体法77

二、非标记抗体法78

第六节 亲和免疫组化技术与亲和组化技术79

一、生物素-亲和素方法染色程序80

二、葡萄球菌A蛋白法80

第七节 免疫组化技术的应用81

一、免疫组化在人体研究中的主要用途81

二、中间丝蛋白的证明及其应用82

三、淋巴造血组织的标记及其应用86

四、神经内分泌组织和肿瘤的免疫组化88

五、雌激素和孕激素受体的检测及其意义89

本章 附录：人体正常组织和细胞的免疫组化表型91

第四章 核酸分子原位杂交95

第一节 核酸分子原位杂交技术的建立和发展95

第二节 探针的类型、标记和鉴定96

一、探针的类型和标记方法96

二、探针的标记物97

三、探针的鉴定98

第三节 原位杂交的实验程序和对照98

一、原位杂交的实验程序99

二、原位杂交的对照实验102

第四节 荧光原位杂交103

一、FISH方法学和探针的种类103

二、FISH的应用与展望104

第五节 原位多聚酶链式反应技术107

一、原位PCR的基本原理及分类107

二、基本方法108

三、原位PCR技术的应用及存在的问题110

第六节 核酸分子原位杂交技术的应用111

本章 附录113

第五章 细胞增殖和凋亡的检测120

第一节 细胞增殖测定技术120

一、核分裂计数120

二、3H标记胸腺嘧啶脱氧核苷掺入标记技术121

三、溴脱氧尿嘧啶核苷标记技术121

四、免疫组织化学（免疫细胞化学）方法122

五、嗜银核仁组成区法124

六、DNA含量和S期分数的流式细胞术测定124

第二节 细胞凋亡检测技术125

一、凋亡细胞的形态学观察126

二、凋亡细胞的原位末端标记法127

三、凋亡细胞的免疫组织化学和亲和细胞化学检测法129

四、细胞凋亡的琼脂糖凝胶电泳法130

五、细胞凋亡的ELISA检测法131

六、细胞凋亡的FCM检测132

第三节 存在的问题及展望134

第六章 激光共聚焦扫描显微术137

第一节 工作原理137

一、仪器系统概述137

二、共聚焦成像原理138

三、参数的选择139

第二节 对生物材料的基本要求142

一、多聚赖氨酸（poly-1-1ysine）法142

二、蛋清（albumineggwhite）法142

三、Cell-Tak法142

第三节 荧光定性、定量测量142

一、荧光测量的基本方法143

二、选择荧光探针的原则145

三、常用荧光探针性质及应用145

第四节 实验分析与功能150

一、实验分析的信息形式150

二、实验分析150

三、激光共聚焦显微镜的生物学应用151

四、激光共聚焦显微镜的激光生物学应用151

第五节 在医学研究中的实际应用153

一、大肠癌转移及转移机制研究153

二、乳腺癌病因学的研究153

三、受体介导巨噬细胞内吞研究中的应用153

四、在循环系统疾病中的研究154

五、在眼科学中的应用156

六、在树突状细胞研究中的应用157

第七章 显微切割技术160

一、显微切割技术发展的回顾160

二、显微切割的材料162

三、显微切割的标记方法162

四、目前使用的主要的显微切割技术方法162

五、显微切割技术的应用163

六、显微切割技术的展望164

第八章 组织芯片技术167

第一节 组织芯片的设计和制作167

一、组织芯片的设计168

二、石蜡包埋组织芯片的制作168

三、可能出现的技术问题和对策169

第二节 组织芯片的特点及其应用169

一、组织芯片技术的应用169

二、组织芯片的局限性170

第九章 电子显微镜技术172

第一节 透射电子显微镜与超薄切片技术172

一、透射电子显微镜的基本原理与结构172

二、超薄切片技术174

第二节 扫描电镜技术182

一、扫描电镜的基本原理与特点182

二、扫描电镜的标本制备183

第三节 免疫电子显微镜技术185

一、概述185

二、免疫电镜技术的种类186

三、材料与方法187

四、胶体金的双标记法189

五、免疫电镜技术操作程序189

索引192