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第一部分 微生物的形态学研究方法1

Ⅰ微生物的形态观察1

一、细菌的形态观察1

实验一 普通光学显微镜的使用及活细菌观察1

实验二 细菌的简单染色和革兰氏染色5

实验三 细菌的荚膜染色8

实验四 细菌的芽孢染色10

实验五 细菌的鞭毛染色（附细菌的运动性观察）11

实验六 蓝细菌的培养与观察15

二、放线菌形态观察16

实验七 用玻璃纸琼脂平板透析培养法观察放线菌形态16

实验八 用插片培养法观察放线菌的形态16

实验九 放线菌的印片染色法17

三、真菌的形态观察18

实验十 霉菌形态及无性孢子的观察18

实验十一 霉菌封闭标本的制备19

实验十二 霉菌接合孢子的培养与观察20

实验十三 酵母菌子囊孢子的培养与观察21

实验十四 伞菌担子和担孢子的压片观察22

实验十五 镰刀菌分生孢子的培养与观察22

四、病毒的形态观察23

实验十六 昆虫病毒多角体的染色与观察23

实验十七 噬菌斑的培养与观察24

五、藻类和原生动物的形态观察25

实验十八 衣藻和水绵的形态观察25

实验十九 草履虫和眼虫的培养与观察27

实验二十 变形虫的培养与观察28

Ⅱ微生物的大小与数量测定30

实验二十一 微生物细胞大小的测定30

实验二十二 微生物细胞的显微直接计数法32

实验二十三 稀释平板测数法34

实验二十四 稀释培养计数36

实验二十五 比浊法测定大肠杆菌的生长曲线39

第二部分 微生物的纯培养技术41

Ⅰ培养基的制备41

一、培养基的配制方法41

二、几种常用培养基的配制43

实验二十六 牛肉膏蛋白胨培养基的制备43

实验二十七 高氏一号合成培养基的制备44

实验二十八 马丁-孟加拉红培养基的制备45

实验二十九 马铃薯蔗糖琼脂培养基的制备46

实验三十 土壤浸出液培养基的制备47

实验三十一 麦芽汁培养基和米曲汁培养基的制备48

实验三十二 明胶培养基的制备49

实验三十三 石蕊牛乳培养基的制备49

Ⅱ 灭菌和消毒51

一、干热灭菌法51

二、湿热灭菌法52

三、过滤除菌57

四、紫外线杀菌58

五、化学药剂消毒杀菌58

Ⅲ微生物接种技术60

一、接种前的准备工作60

二、几种常用的接种技术62

第三部分 微生物的营养与环境条件65

实验三十四 营养元素对微生物生长的影响65

实验三十五 氧气对微生物生长的影响66

实验三十六 温度对微生物生长的影响66

实验三十七pH对微生物生长的影响67

实验三十八 紫外线杀菌实验68

实验三十九 化学药剂对微生物的作用70

实验四十 微生物的拮抗实验71

实验四十一 微生物的耐盐性实验71

第四部分 微生物的分离与纯化73

Ⅰ微生物纯培养分离纯化的一般方法73

实验四十二 土壤中好气性细菌的分离与计数（附划线分离法）73

实验四十三 厌氧细菌的分离培养75

实验四十四 土壤中纤维素分解菌的分离培养76

实验四十五 土壤中的固氮菌的分离培养78

实验四十六 豆科植物根瘤中根瘤菌的分离79

实验四十七 死虫中苏云金芽孢杆菌的分离80

实验四十八 土壤中有机磷农药降解菌的分离81

实验四十九 土壤中放线菌的分离与计数82

实验五十 土壤中真菌的分离与计数83

实验五十一 酒曲中酵母菌的分离84

实验五十二 担子菌的弹射分离84

实验五十三 土壤中丛枝菌根真菌的筛选分离85

实验五十四 自然环境中噬菌体的分离86

实验五十五 土壤中藻类的分离87

实验五十六 土壤中原生动物的分离89

Ⅱ微生物的形态鉴定方法91

实验五十七 各类微生物菌落的识别91

Ⅲ微生物的生理鉴定常规实验93

实验五十八 微生物对含碳化合物的分解和利用93

唯一碳源实验93

糖、醇、糖苷类碳源的分解实验93

淀粉水解实验94

纤维素分解实验95

果胶分解实验96

油脂水解实验96

甲基红（M.R.）实验97

乙酰甲基甲醇（V.P.）实验97

柠檬酸盐实验98

实验五十九 微生物对含氮化合物的分解和利用99

唯一氮源实验（无机氮）99

明胶液化实验100

石蕊牛乳实验100

产氨实验101

产硫化氢实验102

硝酸盐还原实验103

吲哚实验104

实验六十 微生物的产酶实验105

过氧化氢酶实验105

苯丙氨酸脱氨酶实验106

卵磷脂酶实验106

实验六十一 利用BIOLOG系统进行微生物的分类鉴定107

Ⅳ微生物的血清学鉴定110

实验六十二 抗血清制备110

实验六十三 直接凝集反应112

实验六十四 免疫电泳115

实验六十五 双向免疫扩散116

Ⅴ微生物的分子鉴定118

实验六十六 细菌总DNA的提取118

实验六十七PCR扩增细菌16S rRNA序列119

实验六十八 细菌16S rRNA序列的克隆121

第五部分 微生物育种技术和菌种保藏124

实验六十九 三亲本杂交124

实验七十 细菌的专性转导125

实验七十一 细菌的转座突变129

实验七十二 细菌的互补测验130

实验七十三 大肠杆菌的中断杂交实验131

实验七十四 紫外线诱变技术及营养缺陷型突变株的筛选134

实验七十五 亚硝酸诱变技术及乳糖发酵突变株的筛选137

实验七十六 原生质体融合139

实验七十七 脉孢菌的分离和交换141

实验七十八 微生物菌种保藏143

第六部分 应用微生物实验150

实验七十九 豆科植物根瘤的固氮酶活性测定150

实验八十 根瘤菌的荧光标记及检测152

实验八十一 泡囊丛枝状菌根的染色154

实验八十二 苏云金芽孢杆菌杀虫剂的生物测定155

实验八十三 抗生素的效价测定（管碟法）158

实验八十四 棉铃虫核多角体病毒的室内培养及效价测定160

实验八十五 乙醇发酵（附巴斯德效应）162

实验八十六 乳酸发酵165

实验八十七 酸奶制作166

实验八十八 水中细菌总数和大肠菌群的检测168

实验八十九 食品中菌落总数和大肠菌群的检测175

实验九十 食品中沙门氏菌的检测179

实验九十一 环境微生物细胞的固定化技术184

实验九十二 产蛋白酶和淀粉酶芽孢杆菌的分离和酶活力检测185

实验九十三 利用PCR-DGGE方法对土壤微生物群落多样性的检测188

主要参考文献194

附录一 微生物实验课常用玻璃器皿的清洁法195

附录二 教学常用菌种198

附录三 常用培养基配方200

附录四 常用染色液的配制222

附录五 缓冲液的配制227

附录六 常用试剂和指示剂的配制232

附录七 微生物混浊度计数法麦兰云度计的配制与菌数对照表235

附录八 几种法定单位的名称与换算236

附录九 最大或然数统计表238