流式细胞术原理与应用教程2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

流式细胞术原理与应用教程PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一章 流式细胞仪基本结构与工作原理1

第一节 流式细胞术发展简史1

第二节 流式细胞仪的基本结构2

一、流式细胞仪分类3

二、流式细胞仪的基本结构4

第三节 流式细胞仪的工作原理12

一、流式细胞仪的分析原理12

二、流式细胞仪的分选原理14

第四节 流式细胞仪的光信号检测17

一、散射光信号检测17

二、荧光信号检测18

第五节FCM常用荧光染料22

一、单克隆抗体标记的荧光染料22

二、核酸荧光染料23

第六节FCM的主要技术指标26

一、荧光分辨率26

二、荧光测量灵敏度27

三、前向散射光检测灵敏度27

四、FCM分析速度27

五、FCM分选指标27

六、其他软指标28

第七节FCM仪器校正和维护与保养方法28

一、FCM仪器校准28

二、FCM仪器维护与保养方法29

第二章 流式细胞术的数据采集与分析31

第一节 流式细胞术的数据显示方法31

一、单参数直方图31

二、散点图32

三、等高图32

四、密度图33

五、假三维图33

六、三维图34

七、多参数组合分析34

第二节 流式细胞术数据采集与分析方法35

一、CellQuest软件主界面35

二、流式细胞术的数据采集方法37

三、流式细胞术的数据分析方法38

第三章 流式细胞术的样品制备方法39

第一节 单细胞悬液的制备39

一、新鲜实体组织单细胞悬液制备39

二、石蜡包埋组织单细胞悬液制备41

三、培养细胞的单细胞悬液制备42

四、外周血单细胞悬液制备42

五、骨髓有核细胞悬液的制备43

六、活检、内镜取材标本单细胞悬液制备43

七、脱落细胞的单细胞悬液制备44

第二节 荧光抗体的选择与使用原则44

一、根据信噪比选择抗体滴度，低表达抗原标记高信噪比荧光素44

二、多色分析时组合抗体的使用原则45

三、根据仪器型号和抗原表达强弱合理选择荧光抗体45

第三节 样品的荧光素标记与影响因素45

一、荧光抗体直接标记法46

二、荧光抗体间接标记法46

三、样品荧光素标记影响因素46

第四节FCM检测样品对照的设置47

一、阳性对照47

二、阴性对照47

三、补偿对照48

第五节 样品的固定与保存48

一、固定剂的作用48

二、固定方法48

第四章 流式细胞术的应用50

第一节FCM在临床医学中应用50

一、淋巴细胞亚群分析50

二、血小板分析50

三、网织红细胞分析52

四、白血病和淋巴瘤免疫分型53

五、HLA-B27表型分析53

六、PNH诊断54

七、人类同种异体器官移植中的应用55

八、艾滋病的诊断与治疗56

九、临床肿瘤学中的应用56

十、临床微生物学中的应用57

第二节FCM在基础研究中的应用57

一、DNA分析57

二、细胞凋亡分析62

三、树突状细胞（DC）研究66

四、造血干／祖细胞研究67

五、细胞膜电位测定69

六、胞内钙离子测定70

七、细胞内pH测定71

八、细胞内活性氧检测71

九、蛋白质磷酸化检测72

十、染色体分析74

十一、精液质量检测76

十二、flow-FISH法测定端粒长度78

十三、肿瘤多药耐药性检测78

十四、人类调节性T细胞检测80

十五、细胞因子检测81

第三节 流式细胞术在海洋生物中应用83

一、FCM在海洋浮游植物研究中的应用84

二、FCM在海洋细菌研究中的应用85

三、FCM在海洋经济动物细胞核研究中的应用85

第四节FCM分选技术应用与注意事项86

一、分选应用86

二、分选注意事项86

第五节 定量流式细胞术与应用87

一、校准微球88

二、定量流式细胞分析方法88

三、定量流式细胞术的应用91

第六节 流式微球捕获芯片技术（CBA方法）92

一、CBA工作原理92

二、CBA特点93

三、所需试剂与仪器94

四、主要实验步骤94

五、CBA Flex Set试剂组合94

第五章 流式细胞术的优越性、发展趋势与展望96

一、流式细胞术的优越性96

二、流式细胞术的发展趋势96

三、展望97

第六章 流式细胞术常用实验方法和注意事项98

第一节 流式细胞术常用试剂98

一、4％多聚甲醛的配制98

二、PBS配制98

三、溶血剂的使用98

四、破膜剂的使用99

第二节 流式细胞术常用实验99

实验一 外周血淋巴细胞亚群测定（CD系列）99

一、原理99

二、样本采集与处理100

三、样本制备100

四、结果分析100

实验二 激活的淋巴细胞内细胞因子的检测100

一、简介100

二、检测方法101

实验三 细胞凋亡检测107

一、碘化丙啶单染法108

二、Annexin V /PI双染色法109

三、Caspase-3活性检测法110

四、DNA断裂点标记110

五、凋亡相关蛋白检测113

实验四 细胞周期与DNA倍体分析114

一、原理114

二、试剂配制和实验步骤114

三、结果判定114

四、注意事项114

实验五 液相中细胞因子的CBA方法检测114

一、流式微球捕获芯片技术（Cytometric Beads Array， CBA）114

二、CBA Flex set检测方法116

实验六 细胞RNA含量测定122

一、原理122

二、试剂122

三、染色步骤122

四、检测分析122

实验七 细胞总蛋白质含量测定123

一、原理123

二、样品制备123

三、检测分析123

实验八 网织红细胞分析123

一、原理123

二、样品制备124

三、检测分析124

实验九 外周血白细胞HLA-B27抗原分析124

一、原理124

二、样品制备124

三、检测分析125

实验十 血小板膜糖蛋白分析125

一、原理125

二、样品制备125

三、检测分析126

参考文献127

附录1商品化流式细胞仪概述131

一、美国BD公司生产流式细胞仪131

二、美国Coulter公司生产流式细胞仪134

附录2流式细胞术应用实例彩色图谱137