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1 基因操纵——个全面涵盖的技术1

前言1

序列分析1

细胞内的生物化学2

新医学3

生化科技：新兴的工业4

大肠杆菌的中心角色6

本书的其他摘要6

2 基本技巧9

前言9

基本问题9

解决方法：基本技巧9

琼脂糖电泳10

核酸点渍法12

大肠杆菌的转形19

聚合酶连锁反应21

3 DNA分子的截段及接合29

DNA分子的截段29

接合DNA分子39

4 质粒及噬菌体载体的基本生物学49

质粒生物学及简单的质粒载体49

质粒DNA的纯化作用54

质粒选殖工具的适宜特性56

细菌噬菌体λ60

改良的噬菌体-λ载体65

使用单股DNA载体进行DNA选殖69

5 黏接质体，Phasmids，及其他先进的载体73

前言73

选殖大DNA片段的载体73

专门性目的的载体79

全部放在一起：具多重特性的载体94

6 基因选殖策略97

前言97

组基因DNA的选殖98

互补DNA的选殖106

筛选方法118

差异选殖135

7 序列鉴定及诱变作用143

前言143

基本的DNA序列鉴定143

完整基因组的序列鉴定149

序列资料的分析150

改变基因：作用点-引导的诱变作用156

8 非大肠菌之细菌选殖165

前言165

细菌细胞之DNA引入165

于非大肠杆菌之革兰氏阴性菌中之复制170

革兰氏阳性菌之选殖174

同生态重组183

9 酿酒酵母及其他真菌之选殖185

前言185

DNA引入霉菌后之命运186

使用于真菌中之质体载体187

类-逆转录酶病毒载体189

选殖基因之表现193

真菌中蛋白质的过度表现195

特殊载体195

酵母菌之表面展示199

带有特殊细胞活性基因的确认200

决定功能的特殊基因202

10 基因殖入动物细胞205

前言205

DNA媒介基因转入法206

利用病毒性基因导入殖入基因225

用于动物细胞的表现载体系统的总结241

11 动物的基因操作245

前言245

哺乳动物的基因操作246

其他脊椎动物的基因转殖262

其他无脊椎动物的基因转殖267

12 植物的基因转移273

前言273

植物肿瘤菌媒介的转基因277

DNA直接移植植物292

植物转形法294

叶绿体基因转移法295

植物病毒型之载体296

13 基因转殖技术之进展303

前言303

诱导性基因表达系统303

定点式重组基因之应用310

更多的基因抑制策略317

转殖技术应用在功能性基因体324

14 重组DNA技术的应用333

前言333

主题1：核酸的顺序当做是诊断的工具333

主题二：遗传性疾病的新药品和新疗法342

主题三：对抗传染性疾病352

主题四：蛋白质工程360

主题五：代谢工程364

主题六：21世纪的植物繁衍372

结语：从基因到基因型381

参考文献383

索引441