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第一部分 细胞工程及基因工程疫苗1

实验一 原核表达载体的构建及蛋白质的表达1

（一）实验流程参考图1

（二）质粒DNA的提取和酶切电泳鉴定2

（三）目的基因的获得和重组载体的构建5

（四）感受肽细胞的制备和转化及筛选鉴定8

（五）目的基因在原核细胞中的表达与SDS-PAGE、West-blot鉴定11

实验二 丽春番茄遗传转化体系的建立16

（一）GFP基因的植物表达载体的构建17

（二）冻融法将pBI121 GFP导入农杆菌20

（三）农杆菌的转化22

（四）检测23

实验三 融合基因在毕赤酵母中的表达27

（一）融合基因的构建29

（二）重组酵母表达载体的构建32

（三）重组菌株的构建33

（四）酵母工程菌株的甲醇诱导分泌表达34

第二部分 生化药物36

实验四 天然产物的提取分离及检测36

（一）虎杖中蒽醌类化合物的提取、分离和检识36

（二）槐米中芦丁的提取、分离和检识39

（三）黄芩苷的提取、分离和检识42

（四）氧化苦参碱的提取、分离和鉴定43

（五）大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定46

（六）生物有机质的提取、分离（设计实验）48

（七）真菌多糖的提取、化学结构及其药理活性研究49

（八）真菌多糖的体内抗肿瘤活性检测57

第三部分 酶工程58

实验五 酶工程技术58

（一）羧肽酶的制备及其性质58

（二）蛋清中溶菌酶的提取及活力测定62

（三）大蒜细胞SOD的提取和分离64

（四）Western-Blotting技术65

第四部分 免疫技术69

实验六 单克隆抗体的制备69

（一）材料与方法69

（二）结果74

（三）讨论75

实验七 多克隆抗体的制备、纯化及免疫电泳77

（一）多克隆抗体的制备77

（二）亲和层析法纯化抗体79

（三）免疫电泳80

第五部分 发酵工程及能源83

实验八 玉米原料酒精发酵实验83

第六部分 生物材料85

实验九 光与生物实验85

（一）紫外—可见吸收光谱法定量分析色氨酸85

（二）生物液体的渗透压——巴尔德热尔和拉斯特法86

（三）Scatchard图分析血红蛋白和红细胞膜相互作用90

（四）红细胞溶血速率的测量92

（五）生物大分子荧光光谱的测量94

（六）芳香族氨基酸和蛋白质的低温磷光光谱的测量97

实验十 He-Ne激光辐照对白菜种子萌发及生理影响100

实验十一 Nd3+：YAG倍频激光对大豆幼苗异黄酮的影响106

实验十二 Ⅰ型胶原的提取和提纯，Ⅱ型胶原的提取114

实验十三 Ⅱ型胶原粗提液的提纯115

实验十四 胶原凝胶116

（一）胶原凝胶的制备116

（二）胶原凝胶中原位培养细胞制备支架117

（三）提纯壳聚糖及壳聚糖凝胶的制备118

（四）纳米羟基磷灰石的制备119

附录一 常用洗涤剂的配制及用途121

附录二 常用蛋白质分子量标准参照物122

附录三 常用化学试剂等级表示法及用途123

附录四 常用单位名称及其缩写124

附录五 常用缓冲溶液常用浓度及pH值范围125

附录六 常用三种凝胶的种类型号及性能126

附录七 硫酸铵饱和度的常用表127

参考文献129