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第一章　基础血液学实验原理与方法1

第一节　血涂片细胞形态学检查1

第二节　血涂片寄生虫形态学检验7

一、血膜染色法7

二、血涂片寄生虫形态学检查8

第三节　血涂片病菌检查11

一、组织胞浆菌形态学检查11

二、马尔尼菲青霉菌形态学检查12

第四节　血液细胞功能检验12

一、中性粒细胞功能检查12

二、血小板功能检查16

第二章　血液细胞形态学实验原理与方法20

第一节　骨髓检查的方法21

一、骨髓检查的适应证和禁忌证21

二、骨髓检查的作用21

三、骨髓检查的方法21

四、涂片和染色方法24

第二节　骨髓检查分析与结果报告方法24

一、低倍镜检查24

二、有核细胞增生程度检查24

八、结合临床分析25

七、其他25

六、粒红比值计算25

四、有核细胞（ANC）分类25

三、巨核细胞计数与分类25

五、形态观察25

九、结合血常规分析27

十、骨髓象分析29

第三节　骨髓细胞形态学35

一、红系细胞形态35

二、粒系细胞形态38

三、单核细胞形态43

四、淋巴细胞及浆细胞形态44

五、巨核细胞形态47

六、组织细胞形态49

一、实验室检查50

二、各种骨髓转移癌细胞形态50

七、其他细胞形态50

第四节　骨髓转移恶性肿瘤细胞形态50

第三章　细胞化学染色原理与方法52

一、细胞化学染色临床52

二、基本研究方法52

第一节　细胞化学染色方法54

一、过氧化物酶染色54

二、过碘酸一席夫反应55

三、普鲁士蓝反应（铁染色）56

四、苏丹黑B染色57

五、中性粒细胞碱性磷酸酶染色58

一、氯醋酸萘酚酯酶（AS-D NCE）染色59

第二节　酯酶染色法59

二、α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）染色60

三、酯酶双染色61

四、酸性磷酸酶染色62

五、阿利新蓝染色63

六、？小体染色64

第四章　血液生物化学检测原理与方法65

第一节　红细胞酶病检测方法与应用65

一、红细胞酶活性及代谢产物检测基本方法65

二、红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定66

三、红细胞丙酮酸激酶活性定量测定69

四、红细胞葡萄糖磷酸异构酶活性定量测定70

第二节　血红蛋白异常检测方法71

一、血红蛋白溶液的制备71

二、红细胞脆性试验（一管法）71

三、抗碱血红蛋白测定（一分钟碱变性试验）72

四、血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳73

五、血红蛋白A2测定（醋酸纤维薄膜电泳法）74

六、异常血红蛋白异丙醇试验75

七、变性珠蛋白包涵体检查75

八、珠蛋白肽链聚丙烯酰胺凝胶电泳分析76

九、含铁血黄素尿检查（Rous试验）77

第三节　红细胞膜缺陷检查78

一、红细胞渗透脆性试验（简易半定量法）78

二、红细胞孵育脆性试验（Dacie法）79

三、自身溶血试验及葡萄糖纠正实验80

四、蔗糖溶血试验（糖水试验）81

五、热溶血试验82

六、酸化甘油溶血试验（AGLT）82

第四节　铁代谢检测原理与方法83

一、血清铁检测83

二、血清总铁结合力84

三、运铁蛋白检测84

四、运铁蛋白饱和度检测85

五、血清铁蛋白检测85

六、红细胞内游离原卟啉检测86

一、血浆维生素B12检测88

第五节　维生素B12与叶酸检测原理与方法88

二、血浆叶酸检测90

第五章　血液免疫学检查原理与方法92

第一节　免疫因素所致溶血性贫血检测原理与方法92

一、直接抗人球蛋白试验（直接Coombs试验）92

二、单克隆抗人球蛋白试验直接反应93

三、抗人球蛋白试验间接反应93

四、冷凝集素试验94

五、冷溶血试验95

六、冷溶血试验简易法96

七、酸化溶血试验（Hams）96

八、血细胞CD55、CD59检测97

二、粒细胞抗体化学发光法检测98

三、粒细胞抗体流式细胞术检测98

一、粒细胞抗体荧光免疫法检测98

第二节　粒细胞抗体检测98

第三节　血小板表面相关抗体和补体测定99

一、血小板相关抗体和补体（酶联－双抗体夹心法）99

二、血小板膜糖蛋白Ⅱb-Ⅲa自身抗体测定101

三、药物相关自身抗体测定（间接免疫荧光法）102

四、异体同种抗血小板抗体的检测102

第四节 白血病细胞免疫表型的检测原理和方法103

一、细胞酶联免疫检测法（一步法）103

二、细胞酶联免疫检测法（二步法）105

三、细胞酶联免疫检测法（三步法）108

四、细胞酶联免疫检测IGS法（免疫金法）110

五、细胞酶联免疫检测IGSS法（免疫金银法）111

六、细胞酶联免疫检测GIGSS法（彩色免疫金银法）112

七、细胞免疫检测Histogold法112

第五节　流式细胞仪在血液学中的应用113

一、流式细胞仪的使用步骤113

二、流式细胞仪的质控115

三、淋巴细胞亚群分析115

四、流式细胞仪对死细胞、活细胞的计数（活细胞荧光染色）116

五、细胞DNA显示法116

六、DNA和RNA双重染色117

七、细胞DNA与蛋白质双重染色117

八、DNA与癌基因探针双标记测定117

九、流式细胞术检测残余肿瘤细胞（MRD）118

十、流式细胞术检测肿瘤细胞多药耐药基因蛋白119

十一、肿瘤细胞核内DNA断裂标记分析120

十二、Annexin V探针识别肿瘤细胞膜磷脂酰丝氨酸120

十三、肿瘤细胞凋亡相关AP O2.7检测121

十四、具有造血干细胞表型CD34细胞计数121

十五、流式细胞术测定CD+34/CD±45细胞绝对值计数122

十六、淋巴细胞CD+4计数122

十七、HLA-B27测定123

十八、流式术T淋巴细胞体外活化表型的检测123

十九、流式术检测血小板活化124

二十、流式仪检测网织红细胞124

二十一、网织血小板计数125

二十二、细胞周期与DNA倍数流式仪分析法125

二十三、白血病细胞的免疫分型（流式仪法）126

第六章 出血与凝血相关实验原理与方法133

第一节　外源性凝血途径133

一、血浆凝血酶原时间（PT）测定133

二、凝血酶原时间延长的纠正试验133

三、因子V活动度测定134

四、因子Ⅶ活动度测定134

五、因子Ⅱ（Ⅱ:C）、Ⅴ（Ⅴ:C）、Ⅶ（Ⅶ:C）和Ⅹ（Ⅹ:C）凝血活性测定法（一期法）135

第二节　内源性凝血途径136

一、部分凝血活酶时间测定（APTT）136

二、简易凝血活酶生成试验（STGT）137

三、STCT纠正试验137

四、因子Ⅷ（Ⅷ:C）、Ⅸ（Ⅸ:C）、Ⅺ（Ⅺ:C）、Ⅻ（Ⅻ:C）凝血活性测定（一期法）138

五、VWF相关抗原测定（火箭电泳法，VWFAg）139

第三节　凝血共同途径141

一、凝血酶时间测定（TT）141

二、因子ⅩⅢ缺乏筛选试验141

三、单碘醋酸耐量试验141

四、因子ⅩⅢ活性（ⅩⅢ:C）半定量测定法142

五、因子ⅩⅢα亚基和ⅩⅢβ亚基的抗原性测定143

六、甲苯胺蓝纠正试验（游离肝素时间测定）143

第四节　有关纤维蛋白溶解的实验143

一、血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P试验）143

二、连续稀释的硫酸鱼精蛋白副凝固试验144

三、D-D二聚体检测145

四、FDP纤维蛋白原降解产物（胶乳凝集免疫法）检测145

五、抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）显色肽法测定146

六、a2-巨球蛋白测定（α2-M）147

第七章　其他血液学研究技术148

第一节　造血细胞培养技术148

一、造血细胞培养基本方法148

二、台盼蓝排斥试验（死、活细胞计数）149

三、高增殖潜能集落形成细胞（HPP-CFC）琼脂培养法150

四、高增殖潜能集落形成细胞（HPP-CFC）软琼脂培养法151

五、混合集落形成细胞（CFU-Mix）琼脂培养法152

六、粒单细胞集落形成细胞（CFU-GM）培养甲基纤维素法（表7—3）153

七、红系集落形成单位（BFU-E）甲基纤维素法（表7—4）153

八、成纤维细胞祖细胞（CFU-E）分析154

九、MTT比色肿瘤细胞药物敏感实验154

十、XTT比色肿瘤细胞药物敏感实验155

十一、细胞的冻存和解冻156

第二节　血液细胞遗传学分析原理与方法157

一、人类外周血细胞培养及染色体制备157

二、人类骨髓细胞培养及染色体制备158

三、染色体高分辨显带方法158

四、人类染色体的鉴定161

五、染色体荧光原位杂交技术（FISH）163

六、自动化细胞遗传学研究164

七、染色体畸变与血液病164

第三节　血液细胞分子生物学基本技术164

一、聚合酶链反应（PCR）基本研究方法164

二、限制性阶段长度多态性PCR技术（PCR-PFCP）166

三、血友病携带者检测和产前诊断167

四、逆转录酶－聚合酶链反应（PT-PCR）170

五、多重RT-PCR技术鉴定BCR/ABL融合基因的组成类型172

六、BCR-ABL转录产物特异性的巢式引物PCR173

七、聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR-single strandcostruction polymorphism,PCR-SSCP）检测174

八、PCR-变性梯度凝胶电泳（PCR-denaturing gradi-ent gel electrophoresis,PCR-DGGE）176

九、变性梯度凝胶电泳177

十、PCR测序法177

十一、鲍氏威酸诱导急性早幼粒白血病细胞分化与PML/RARα180

第四节　血液系统疾病蛋白质组学的基本研究方法183

一、蛋白质组学研究的简要内容183

二、蛋白质组分析的基本流程图185

三、蛋白质、核酸、糖类的生物质谱技术（MALDI-TOF-MS）分析191

四、肽质量指纹谱（PMF）鉴定蛋白质技术（MALDI-TOF-MS）192

五、MALDI-TOF-MS质谱技术肽段源后衰变（PSD）得到结构信息193

六、白血病细胞中枢神经系统浸润机制的蛋白质组学研究194

七、蛋白质组学常用数据库196

第八章　贫血性疾病200

第一节　再生障碍性贫血200

第二节　再生障碍危象202

第三节　纯红细胞再生障碍性贫血203

第四节　纯粒细胞再生障碍性贫血204

第五节　纯巨核细胞性再生障碍性贫血204

第六节　缺铁性贫血205

第七节　铁粒幼细胞贫血207

第八节　巨幼细胞性贫血208

第九节　溶血性贫血212

一、遗传性球形红细胞增多症213

二、遗传性椭圆形红细胞增多症214

三、遗传性口形红细胞增多症215

四、红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷症215

五、红细胞丙酮酸激酶缺陷症217

六、镰状细胞贫血（HbS病）217

七、血红蛋白E病218

八、血红蛋白M病219

九、不稳定血红蛋白病219

十、珠蛋白生成障碍性贫血220

十一、阵发性睡眠性血红蛋白尿症222

十二、温抗体型自身免疫性溶血性贫血224

十三、冷凝集素综合征224

十四、阵发性冷性血红蛋白尿症225

十五、药物诱发的免疫性溶血性贫血226

十六、新生儿同种免疫性溶血病227

十七、微血管病性溶血性贫血227

十八、心血管损伤性溶血性贫血228

十九、行军性血红蛋白尿症229

二十、棘细胞增多症229

二十一、Evans综合征230

第十节　系统性疾病贫血230

一、慢性感染性贫血230

二、慢性肝疾病所致贫血231

三、慢性肾疾病所致贫血231

四、恶性肿瘤所致贫血231

六、骨髓病性贫血232

五、内分泌疾病所致贫血232

七、卟啉病233

八、特发性肺含铁血黄素沉着症233

九、肺炎肾出血综合征234

十、血色病234

十一、新生儿严重肝病伴棘细胞增多235

十二、急性失血性贫血235

第十一节　维生素B1反应性巨幼细胞性贫血236

第十二节　先天性红细胞生成异常性贫血236

第十三节　石骨症236

第九章　骨髓增生异常综合征238

第一节　分类238

二、WHO关于骨髓增生异常综合征的分型标准239

一、FAB协作组关于骨髓增生异常综合征的分类标准239

四、骨髓增生异常综合征的FAB分类和WHO分类的比较241

三、1994年我国第四届血细胞学术会议对骨髓增生异常综合征分型建议241

第二节　诊断骨髓增生异常综合征应注意的问题242

一、病态造血现象242

二、原始细胞的界定242

三、单系血细胞病态造血现象的诊断242

四、关于骨髓增生异常综合征的血象改变243

五、Auer小体243

六、幼稚前体细胞异常定位243

第三节　骨髓增生异常综合征的特殊临床表现243

一、无巨核细胞性血小板减少性紫癜及难治性血小板减少症243

四、伴有自身免疫现象的骨髓增生异常综合征244

二、老年特发性大红细胞性贫血244

三、网织红细胞增高的骨髓增生异常综合征244

第十章　慢性骨髓增殖性疾病245

第一节　慢性粒细胞白血病245

一、分期特点245

二、细胞遗传学和分子生物学检查247

三、诊断与鉴别诊断247

第二节　慢性中性粒细胞白血病247

一、临床及血液学表现247

二、诊断与鉴别诊断248

一、临床表现249

二、血液学表现249

第三节　慢性嗜酸性粒细胞白血病和高嗜酸性粒细胞综合征249

三、细胞遗传学改变250

四、诊断与鉴别诊断250

第四节　真性红细胞增多症251

一、临床及血液学表现251

二、诊断与鉴别诊断252

第五节　慢性特发性骨髓纤维化253

一、临床及血液学表现253

二、诊断与鉴别诊断254

第六节　特发性血小板增多症255

一、临床表现及血液学特点255

二、诊断与鉴别诊断256

第七节　慢性骨髓增殖性疾病不能分类257

第十一章　骨髓增生异常／骨髓增殖性疾病258

第一节　慢性粒－单核细胞白血病258

一、临床和血液学表现259

二、诊断与鉴别诊断259

三、我国血液学研究所CMML诊断标准259

四、WHO诊断CMML标准260

五、鉴别诊断260

第二节　不典型慢性髓系白血病260

一、临床和血液学表现260

二、诊断与鉴别诊断261

第三节　幼年型粒－单核细胞白血病261

一、临床与血液学表现261

第四节　骨髓增生异常／骨髓增殖性疾病不能分类262

二、诊断与鉴别诊断262

第一节　急性非淋巴细胞白血病264

一、急性髓系白血病分型264

第十二章　急性白血病264

二、急性髓系白血病免疫表型267

第二节　急性淋巴细胞白血病269

一、急性淋巴细胞白血病分型269

二、血液学特点271

三、细胞遗传学特征271

四、诊断与鉴别诊断272

第十三章　其他类型白血病273

第一节　慢性淋巴细胞白血病273

第三节　T幼淋巴细胞白血病274

第二节　B幼淋巴细胞白血病274

第四节　毛细胞白血病275

第五节　嗜碱性粒细胞白血病276

第六节　急性混合细胞白血病276

第七节　急性红血病277

第八节　淋巴瘤细胞白血病278

第九节　先天性白血病279

第十节　全髓白血病279

第十一节　低增生性急性白血病280

第十二节　继发性白血病281

第十三节　成人T细胞白血病282

第十五节　系统性肥大细胞增生症283

第十四节　肥大细胞白血病283

第十四章　浆细胞性疾病287

第一节　多发性骨髓瘤287

第二节　Waldenstr？m巨球蛋白血症288

第三节　重链病（γ、α、μ、δ型）289

第四节　意义未明单克隆免疫球蛋白血症290

第十五章　组织细胞相关性疾病291

第一节　噬血细胞综合征291

第二节　恶性组织细胞病293

第三节　组织细胞肉瘤295

第四节　反应性组织细胞增多症295

第五节　类脂质沉积病295

一、戈谢病296

二、尼曼－匹克病297

三、海蓝组织细胞增生症298

第十六章　淋巴瘤300

第一节　非霍奇金淋巴瘤300

第二节　霍奇金淋巴瘤301

一、经典型霍奇金淋巴瘤301

二、结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤302

第十七章　血细胞继发性增多303

第一节　类白血病反应303

第二节　继发性血小板增多症304

第三节　继发性红细胞增多症304

第四节　继发性嗜酸性粒细胞增多症305

第一节　神经母细胞瘤306

第十八章　其他疾病306

第二节　传染性单核细胞增多症307

第三节　传染性淋巴细胞增多症308

第四节　EBV导致免疫缺陷宿主B细胞过度增殖308

第五节　白血病前期（淋巴细胞型）309

第六节　血管内恶性淋巴瘤及其亚洲变异型309

第七节　粒细胞缺乏症310

一、病因和发病机制310

二、临床表现310

三、血象310

四、骨髓特点及形态学分型311

第八节　湖南地区首例黑热病的确诊312

一、资料与方法312

六、诊断与鉴别诊断312

五、其他检查312

二、结果313

三、讨论313

第九节　慢性骨髓增殖性疾病误诊切脾实验与临床分析314

一、资料与方法315

二、结果316

第十节　脾功能亢进318

第十九章 巨核细胞系统及出血性疾病320

第一节　血小板减少性紫癜320

一、原发性（特发性）血小板减少性紫癜320

二、继发性血小板减少性紫癜320

二、遗传性出血性毛细血管扩张症321

第二节　血管性紫癜321

一、过敏性紫癜321

三、其他血管性紫癜322

第三节　巨血小板综合征322

第四节　血小板无力症323

第五节　储存池病324

第六节　May-Hegglin异常325

第七节　血友病A325

第八节　血友病B326

第九节　遗传性因子Ⅺ缺乏症327

第十节　血管性假血友病327

一、纤维蛋白原缺乏症329

第十二节　纤维蛋白原缺乏症和ⅩⅢ因子缺乏症329

第十一节　维生素K依赖性凝血因子缺乏症和因子V缺乏症329

二、因子ⅩⅢ缺乏症330

第十三节　抗AHG抗体血症330

第十四节　抗凝物质所致出血性疾病331

第十五节　肝素或类肝素物质增多331

第十六节　肝脏疾病的出凝血异常331

第十七节　系统性红斑狼疮合并的抑制素333

第十八节　肾脏疾病的出凝血异常333

一、肾脏疾病中的出血倾向333

二、肾脏疾病中的血栓形成334

第十九节　弥散性血管内凝血335

参考文献337