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第一部分 常用生物化学实验技术及原理1

一、常用生物材料的处理1

二、比色分析法和分光光度法4

（一）比色分析法的基本原理5

（二）比色分析的测定方法8

（三）比色分析条件的选择10

（四）常用的分光光度计11

三、电泳技术17

（一）基本原理17

（二）醋酸纤维膜电泳20

（三）聚丙烯酰胺凝胶电泳21

（四）等电聚焦电泳29

四、层析法32

（一）层析法中一些术语32

（二）层析法分类33

（三）层析法的理论概述33

（四）凝胶过滤层析35

（五）离子交换层析39

（六）亲和层析43

（七）薄层层析47

五、放射性同位素示踪技术49

（一）基本知识50

（二）放射性核素衰变的规律和性质50

（三）放射性测量的有关知识51

（四）放射免疫测定技术53

（五）放射自显影技术53

第二部分 实验54

六、蛋白质的测定54

实验（一） 凯氏微量定氮法54

实验（二） 酚试剂法56

实验（三） 双缩脲法57

实验（四） 比色法59

七、酶促反应动力学实验60

实验（五） 酚标准曲线的绘制61

实验（六） pH对酶促反应速度的影响62

实验（七） 温度对酶促反应速度的影响63

实验（八） 底物浓度对酶促反应速度的影响64

实验（九） 抑制剂对酶促反应速度的影响65

八、生物氧化66

实验（十） 乳酸脱氢酶及辅酶Ⅰ66

实验（十一） 琥珀酸脱氢酶实验68

实验（十二） 细胞色素氧化酶实验69

九、糖代谢70

实验（十三） 运动对尿中乳酸含量的影响70

实验（十四） 血糖定量71

实验（十五） 胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响73

实验（十六） 肝糖元实验74

十、脂类75

实验（十七） 肝脂质的提取及薄层层析75

实验（十八） 血清总胆固醇定量77

十一、蛋白质代谢78

实验（十九） 转氨基作用78

实验（二十） 血清蛋白的醋酸纤维膜电泳分离及测定80

十二、核酸82

实验（二十一） 酵母RNA的提取82

实验（二十二） 从肝脏中提取DNA83

实验（二十三） 核酸的定量测定84

实验（二十四） DNA定量测定86

实验（二十五） 组织中核酸的分离及定量87

实验（二十六） 紫外吸收测定核酸含量90

十三、人血清抗胰蛋白酶的分离及鉴定91

实验（二十七） 盐析法92

实验（二十八） 凝胶过滤法92

实验（二十九） DEAE纤维素离子交换层析93

实验（三十） 伴刀豆素球蛋白琼脂糖亲和层析95

实验（三十一） SDS聚丙烯酰胺凝胶平板电泳96

实验（三十二） 等电聚焦圆盘电泳98

十四、血清γ-球蛋白99

实验（三十三） 血清球蛋白的分离纯化99

实验（三十四） 凝胶过滤法分离球蛋白的重链与轻链101

十五、同位素实验101

实验（三十五） 尿中激肽含量的放射免疫测定法101

实验（三十六） 胰岛素放射免疫测定103

附录105

一、缓冲液105

（一）一些常用作缓冲剂的化合物的酸解常数105

（二）常用缓冲液的配制方法106

1．磷酸盐缓冲液106

2．巴比妥钠—盐酸缓冲液（18℃）107

3．Tris—盐酸缓冲液（0.05M,25℃）107

二、层析法常用数据表108

（一）葡聚糖凝胶的某些技术数据108

（二）琼脂糖凝胶的技术数据109

（三）各种凝胶所允许的最大操作压109

三、硫酸铵饱和度的常用表110

1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃）110

2．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃）111

四、离心机转数与相对离心力的换算112

五、125I衰变表113

六、FT—613自动计算放免测量仪使用方法113