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第一篇 柽柳及其研究进展1

第1章 柽柳3

第2章 柽柳抗逆生理机制5

第3章 柽柳抗逆分子机制9

第二篇 柽柳抗逆机制的功能基因组学研究11

第4章 cDNA文库的构建及EST分析对柽柳叶基因表达研究13

4.1 NaHCO3胁迫下柽柳叶部cDNA文库的构建13

4.2 NaHCO3胁迫下柽柳叶部基因表达谱14

4.3 讨论26

第5章 cDNA文库构建及EST分析对柽柳根基因表达研究34

5.1 刚毛柽柳根部cDNA文库的构建34

5.2 柽柳根部基因表达谱分析36

5.3 讨论47

第6章 实时定量RT-PCR技术对柽柳不同基因家族抗逆表达分析57

6.1 过氧化物酶（ThPOD）基因家族的克隆与分析58

6.2 ThPrx基因家族的克隆与分析66

6.3 柽柳ThNAC基因家族的克隆和分析71

6.4 讨论84

第三篇 柽柳抗逆相关调控基因的功能分析89

第7章 柽柳bZIP转录因子的抗逆功能分析91

7.1 ThbZIP1基因及启动子克隆91

7.2 ThbZIP1上游表达调控基因研究95

7.3 柽柳ThbZIP识别的顺式作用元件的研究100

7.4 过表达ThbZIP基因拟南芥抗逆性功能分析104

7.5 ThbZIP调控的下游基因的研究109

7.6 柽柳ThbZIP转录因子互作蛋白的研究119

7.7 讨论123

第8章 柽柳ERF转录因子的抗逆功能分析125

8.1 ERF家族基因表达模式分析及ThERF1的亚细胞定位125

8.2 转ThERF1基因拟南芥的抗逆能力分析127

8.3 柽柳ThERF1基因的互作蛋白研究134

8.4 柽柳ThERF1基因上游调控因子的研究135

8.5 ThERF1所识别的元件及调控的下游基因研究142

8.6 讨论145

第9章 柽柳DREB转录因子的抗逆功能分析149

9.1 ThDREB基因时空表达分析149

9.2 重组酵母INVSc1-pYES2-ThDREB抗逆性分析151

9.3 转ThDREB基因烟草的抗逆能力研究152

9.4 讨论156

第10章 柽柳eIF5A基因的抗逆功能分析158

10.1 柽柳eIF5A基因的表达及亚细胞定位158

10.2 柽柳eIF5A基因的抗逆功能分析162

10.3 eIF5A基因的互作蛋白质研究172

10.4 eIF5A上游表达调控基因研究173

10.5 讨论175

第11章 柽柳eIF1A基因抗逆功能分析178

11.1 TheIF1A基因及启动子克隆和分析178

11.2 TheIF1A基因上游调控因子分析181

11.3 过表达TheIF1A能改善转基因烟草的耐盐及抗甘露醇胁迫能力184

11.4 转TheIF1A烟草中逆境胁迫相关基因的表达分析187

11.5 瞬时过表达TheIF1A柽柳的相关分析188

11.6 讨论189

第四篇 柽柳抗逆相关功能基因的耐盐性研究193

第12章 柽柳lea基因的抗逆功能分析195

12.1 lea基因的克隆和序列分析195

12.2 柽柳lea基因酵母表达及抗逆性研究196

12.3 转基因烟草的抗逆能力分析198

12.4 转基因小黑杨的抗逆能力分析209

12.5 讨论218

第13章 柽柳MnSOD基因的抗逆功能分析221

13.1 MnSOD基因的克隆及序列分析221

13.2 盐胁迫后的MnSOD基因在柽柳中的表达223

13.3 重组酵母INVSc1（pYES2-SOD）的抗逆性分析223

13.4 转MnSOD基因山新杨抗逆性研究226

13.5 讨论230

第14章 柽柳ThPOD1基因功能研究233

14.1 柽柳过氧化物酶基因的序列分析233

14.2 RT-PCR检测ThPOD1基因的转录表达特性234

14.3 ThPOD1基因在E.coli中的表达、纯化与特性分析237

14.4 ThPOD1基因不同功能区的原核表达及抗逆性分析239

14.5 柽柳ThPOD1基因在山新杨中的表达及抗逆性分析242

14.6 讨论246

第15章 柽柳硫氧还原蛋白过氧化物酶基因（2Cys-Prx）的抗逆功能分析250

15.1 柽柳2Cys-Prx基因的克隆及生物信息学分析250

15.2 柽柳2Cys-Prx基因在不同非生物胁迫下的表达模式250

15.3 柽柳2Cys-Prx基因的酵母转化及抗逆功能分析252

15.4 柽柳2Cys-Prx基因的烟草转化及抗性分析253

15.5 2Cys-Prx基因的互作蛋白研究256

15.6 讨论262

第16章 柽柳冷适应蛋白基因（cap）在抗旱、耐盐中的作用266

16.1 柽柳冷适应蛋白cap基因的克隆及序列分析266

16.2 逆境胁迫下cap基因的表达267

16.3 重组酵母pYES2-cap抗逆性分析267

16.4 过表达cap基因山新杨抗逆功能分析271

16.5 讨论276

第17章 柽柳泛素交联酶基因（E2s）的遗传转化及抗逆性分析278

17.1 E2s基因的克隆及序列分析278

17.2 E2s基因烟草的分子检测279

17.3 过表达E2s基因烟草抗逆功能分析280

17.4 讨论287

第18章 柽柳rd22基因的克隆及功能验证290

18.1 柽柳rd22基因的克隆及序列分析290

18.2 柽柳rd22基因的遗传转化及分子检测291

18.3 柽柳rd22基因的功能验证292

18.4 讨论302

第五篇 柽柳抗逆功能研究的展望305

参考文献308