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目录1

第一章　生物制药技术实验仪器的洗涤与处理1

第一部分 必备知识1

第二部分　技术常识1

第三部分 实践训练3

第四部分 知识与能力测试4

第二章　生物制药工艺用水制备技术5

第一部分　必备知识5

第二部分 生物制药工艺用水制备技术6

第一节 生物制药工艺用水制备技术6

实验2-1 纯化水的制备8

第二节 生物制药用水制备设备简介11

第三节 纯化水和注射用水的质量要求和检验14

实验2-2 注射用水的制备（演示实验）16

第三部分 实践训练16

第四部分 知识与能力测试16

第三章　基因工程制药技术17

第一部分　必备知识17

第一节 工具酶17

第二节 载体20

第三节 电泳23

第四节 聚合酶链反应26

第五节 基因工程药物生产的基本过程28

第二部分 主要操作技术31

第六节 质粒DNA的提取、酶切及DNA重组31

实验3-1 质粒DNA的分离、纯化32

实验3-2　DNA酶切及凝胶电泳34

实验3-3 质粒DNA与目的DNA的连接36

第七节 感受态细胞的制备及转化37

实验3-4 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化和重组质粒的筛选38

第八节 RNA的提取及目的基因的扩增40

实验3-5 RNA的提取41

实验3-6 聚合酶链反应（PCR）扩增42

第九节 外源基因在大肠杆菌中的表达43

实验3-7 外源基因在大肠杆菌中的表达43

第三部分 实践训练44

第四部分 知识与能力测试45

第四章　植物细胞培养技术46

第一部分 必备知识46

第一节 植物细胞培养特性及条件46

第二部分　操作技术48

第二节 培养基的制备技术48

实验4-1 配制植物组织培养基48

实验4-2　植物的试管快速繁殖技术49

第三节 植物组织培养技术49

第四节 植物细胞培养方法50

实验4-3　植物细胞的悬浮培养51

实验4-4 植物细胞同步培养53

实验4-5 人工种子的制备53

实验4-6 人工种子的保存和发芽54

第五节 植物组织培养过程的检测55

实验4-7 植物细胞培养和次生代谢产物生产56

第六节 植物细胞大规模培养技术的应用58

实验4-8 三七细胞大规模培养58

实验4-9 胡萝卜组织培养59

第三部分 实践训练59

第四部分 知识与能力测试64

第五章　哺乳动物组织细胞培养技术65

第一部分　必备知识65

第一节 动物细胞组织培养的特征及培养条件65

第二部分　操作技术68

第二节 无菌操作的基本要领和要求68

第三节 培养动物组织、细胞培养液的配制69

第四节 动物细胞培养技术71

实验5-1 组织块培养技术74

实验5-2 原代细胞培养——贴壁培养75

实验5-3　传代培养78

第五节 细胞污染的检测与排除79

实验5-4　微生物污染的检测82

第六节 培养物的长期保存技术83

实验5-5　培养细胞的冻存与复苏84

第七节 动物细胞大规模培养方法简介85

第三部分 实践训练88

实验5-6 动物细胞的培养、冻存与复苏88

第四部分 知识与能力测试94

第六章　发酵工程制药技术95

第一部分　必备知识95

第一节 发酵工程简史96

第二节 微生物菌种的处理原则97

第二部分　操作技术98

第三节 发酵过程中培养基的制备与灭菌技术98

实验6-1 培养基的配制与灭菌技术100

第四节 微生物菌种的保藏、退化、复壮与改良技术102

实验6-2 微生物菌种保藏技术105

实验6-3　菌种的复苏与复壮技术109

第五节 微生物发酵过程控制技术110

实验6-4　谷氨酸的制备117

实验6-5 乳酸发酵与乳酸菌饮料制备119

实验6-6 发酵法制备维生素B2（核黄素）120

第六节 基因工程菌的发酵控制121

第七节 发酵工程下游加工过程124

实验6-7 固液分离技术126

第三部分 实践训练127

实验6-8 酒精发酵及糯米甜酒的酿制127

实验6-9 青霉素的生产工艺128

第四部分 知识与能力测试129

附录 常用培养基及其配制129

第七章　生物药物成分的提取纯化技术131

第一部分　必备知识131

第二部分　操作技术132

第一节 细胞破碎技术132

实验7-1 超声波破碎法处理微生物菌体133

第二节 沉淀分离技术134

实验7-2 盐析沉淀法纯化血浆中的免疫球蛋白134

实验7-3　透析法脱盐135

实验7-4 等电点沉淀法纯化牛乳中的酪蛋白136

第三节 萃取分离技术137

实验7-5 用溶剂萃取法提取与精制红霉素138

实验7-6 牛血清白蛋白在双水相萃取系统中的分配138

第四节 过滤与超滤技术140

实验7-7　超滤分离实验142

第五节 泡沫分离技术143

实验7-8 喷雾干燥技术制备奶粉144

第六节 干燥技术144

第七节 色谱分离技术146

实验7-9 离子交换色谱分离混合氨基酸150

第三部分 实践训练152

实验7-10　血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定153

实验7-11 植物叶片细胞膜ATPase分离纯化154

第四部分 知识与能力测试155

第八章酶工程制药技术156

第一部分必备知识156

第一节 酶工程的基本概念156

第二节 酶的分离纯化技术160

第二部分操作技术160

实验8-1 蛋白质总浓度的测定163

实验8-2　SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定蛋白质相对分子质量166

第三节 酶活力与酶制剂的保存168

实验8-3　α-淀粉酶的活力测定169

实验8-4　猪血SOD的提取170

第四节 酶工程的基本手段171

实验8-5 对氨基苯磺酰己基（ABSE）纤维素固定化胰蛋白酶174

实验8-6 PAGE包埋法制备固定化大肠杆菌（E．coli）生成L-天冬氨酸176

第五节 常见的酶类药物及酶工程制药的发展趋势177

第三部分 实践训练178

实验8-7 谷丙转氨酶活力的测定178

实验8-8 菠萝蛋白酶的提取179

实验8-9 卡拉胶固定大肠杆菌（E．coli）L-天冬氨酸的生产工艺180

第四部分 知识与能力测试182

附录8-1 几种常用的不同pH值缓冲液的配制表182

附录8-2 离心力的转换列线图183

第九章　血液制品制备技术184

第一部分 必备知识184

第二部分 血浆蛋白制剂生产技术187

第三部分 实践训练193

参观：1．用低温乙醇法分离和纯化血浆蛋白193

2．冻干设备的应用193

第四部分 知识与能力测试194

第一部分 必备知识195

第十章　细胞因子制备技术195

第二部分　操作技术201

实验10-1 制备白细胞介素-2（IL-2）202

实验10-2 红细胞生成素（EPO）的制备203

实验10-3　人尿集落刺激因子（CSF）的制备204

实验10-4　基因工程α-干扰素的制备205

第三部分 实践训练206

实验10-5 从基因工程菌中提取IFN-β206

实验10-6 天然干扰素IFN-α的制备207

第四部分 知识与能力测试208

第一部分 必备知识209

第十一章　疫苗制备技术209

第二部分 疫苗的制备211

第三部分 实践训练218

实验11-1 乙型脑炎减毒活疫苗的制备218

实验11-2 伤寒Vi多糖疫苗的制备221

第四部分 知识与能力测试224

第十二章　杂交瘤细胞技术和单克隆抗体技术225

第一部分 必备知识225

第一节 单克隆抗体的基本概念和技术原理225

第二部分 单克隆抗体制备技术226

第二节 抗原提纯与动物免疫226

实验12-2　抗体效价测定227

实验12-1 抗原免疫227

第三节 单克隆抗体细胞的选择228

实验12-3 单克隆抗体细胞的制备229

第四节 细胞融合及杂交瘤细胞的选择、筛选230

实验12-4 细胞融合及杂交瘤细胞的选择、筛选和克隆化培养230

第五节 单克隆抗体的制备及纯化231

实验12-5 单克隆抗体的制备及纯化232

第三部分 实践训练233

第四部分 知识与能力测试234

参考文献235