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第一章 细胞悬液的制备与细胞分离技术1

第一节 鼠细胞悬液的制备1

一、脾细胞1

二、胸腺细胞2

三、淋巴结细胞3

四、腹腔细胞(巨噬细胞)5

附 用细胞计数板做细胞计数5

第二节 外周血中淋巴细胞的分离纯化7

一、沉降法7

二、密度梯度离心分离法8

第三节 T、B淋巴细胞的分离10

一、尼龙毛(纤维)分离法10

二、E花环密度梯度离心分离法12

第二章 T淋巴细胞功能的检测14

第一节 外周血T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)的测定14

第二节 T淋巴细胞E花环形成试验16

一、总T玫瑰花试验17

二、活性T玫瑰花试验18

第三节 T淋巴细胞增殖功能测定19

一、ConA刺激淋转试验 颜色反应法(MTT法)19

二、ConA刺激淋转试验 同位素参入法22

三、ConA刺激淋转试验 形态学方法23

第四节 混合淋巴细胞反应25

第五节 迟反型变态反应27

一、足跖厚度增加法27

二、放射性测定法28

三、伊文思蓝比色法29

第三章 B淋巴细胞功能的检测32

第一节 抗体生成细胞检测法(溶血空斑实验)32

一、Jerne改良玻片法32

二、Cuningham小室法(小室液相法)36

三、定量溶血分光光度测定法(QHS法)38

第二节 用半抗原偶联抗原检测抗体形成细胞39

第三节 血清溶血素测定40

一、半数溶血值(HC50)的测定40

二、用血凝法测溶血素滴度42

第四节 人血清中免疫球蛋白含量测定43

第四章 K和NK细胞活性的测定46

第一节 K细胞活性的测定46

一、空斑形成法46

二、同位素51Cr测定法48

第二节 NK细胞活性的测定49

一、乳酸脱氢酶(LDH)测定法49

二、同位素51Cr测定法51

第五章 巨噬细胞和中性粒细胞功能检测53

第一节 巨噬细胞吞噬功能测定53

一、巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验53

二、孔雀绿比色法测定巨噬细胞吞噬功能55

三、中性红比色法测定巨噬细胞吞噬功能57

第二节 碳粒廓清试验58

第三节 巨噬细胞功能-Fc受体检测(EA花环法)60

第四节 溶菌酶的测定61

第五节 中性粒细胞吞噬功能的测定63

第六章 红细胞免疫功能的检测66

第一节 红细胞膜C3b受体及免疫复合物含量测定66

一、红细胞C？b受体花环及免疫复合物花环法66

二、酵母多糖血凝法68

三、补体致敏酵母菌血凝法69

第二节 血清中红细胞免疫调节因子活性的测定70

第三节 红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力的测定72

第七章 细胞因子的检测75

第一节 白细胞介素1(IL-1)的检测75

第二节 白细胞介素2(IL-2)的检测77

一、小鼠脾脏细胞增殖法77

二、CTLL细胞株法78

第八章 宿主抵抗力检测80

第一节 肿瘤细胞攻击实验80

一、PYB6肿瘤细胞攻击实验80

二、肺部转移瘤B16F10攻击实验81

第二节 对细菌和寄生虫的抵抗实验82

一、对李斯特菌的抵抗实验82

二、对链球菌的抵抗实验83

三、对毛线虫的抵抗实验84

第九章 外来化合物致敏作用的检测86

第一节 速发型过敏反应的检测方法86

第二节 皮肤致敏实验88

一、局部封闭涂皮法(BT)88

二、皮内注射法(DT)89

三、皮内和涂皮相结合的方法(GPMT)90

第三节 小鼠耳肿胀实验91

第十章 腘窝淋巴结实验93

一、直接法93

二、间接法94

三、过继转移法95

第十一章 常用免疫标记技术98

第一节 免疫荧光技术98

一、直接免疫荧光法98

二、间接免疫荧光法100

第二节 放射免疫分析技术101

一、放射过敏原吸附试验(RAST)102

二、放射单向免疫扩散法103

第三节 免疫酶技术104

第四节 生物素--？和素技术107

一、BAS-酶免疫检测方法(BAS-ELISA)108

二、其他不同标记材料BAS检测法110

第十二章 细胞内游离钙浓度和钙调素活性的测定112

第一节 细胞内游离钙浓度的测定112

第二节 钙调素活性的测定114

第十三章 国外推荐的免疫毒性检测方案119

第一节 外来化合物对小鼠的免疫毒性检测方案119

一、美国NIEHS提出的方案119

二、美国NTP提出的方案121

三、日本推荐的免疫毒性检测方案122

第二节 外来化合物对大鼠免疫毒性的检测方案123

第三节 外来化合物对人群免疫毒性的检测方案124

第四节 免疫毒性检测指标的敏感性与预测性分析126

第十四章 免疫毒性检测程序及安全性评价131

第一节 免疫毒性检测程序131

第二节 免疫毒性检测在安全性评价中应注意的几个问题132

第十五章 免疫毒理学实验设计136

第一节 免疫毒理学研究中应考虑的问题136

第二节 检测免疫功能的实验模型138

第三节 实验中的质量控制139

附录一 各种溶液及常用细胞染液的配制142

附录二 人与动物常用有关免疫检测新旧单位参考值155