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第一章　神经生物学研究中的科学思维1

第一节　神经生物学的概念与任务1

第二节　神经生物学研究的特点1

第三节　神经生物学研究的方法与思维2

上篇　神经生物学研究中的多学科实验技术方法13

第二章 行为生理学实验技术方法13

第一节　行为生理学简介13

第二节　有关反射性行为的神经调制环路的研究方法17

第三节　神经递质释放量的整体、原位、实时测定21

第四节　神经递质生理功能的测定25

第五节　脑功能成像27

第六节　脑内神经递质受体的原位、实时核素显像30

第三章　电生理学实验技术与仪器31

第一节　电生理学实验仪器的一般介绍31

第二节　微电泳技术简介38

第三节　多电极记录技术38

第四节　膜片钳技术39

第五节　立体定位技术45

第六节　脑电图45

第一节　给药途径与神经递质功能的研究47

第四章　神经药理学方法47

第二节　递质代谢与神经药理研究50

第三节　受体的药理学研究52

第四节　G蛋白与细胞内信使系统的药理学研究52

第五章　神经生物化学方法简介53

第一节　神经组织细胞破碎法54

第二节　用离心法分离突触小体55

第三节　用电泳法分离带电荷的生物大分子56

第四节　色谱分析法及其在神经科学研究中的应用58

第五节　膜受体的放射配体结合分析测定技术65

第六章　神经分子生物学常用技术69

第一节　聚合酶链式反应技术69

第二节　核酸分子杂交技术76

第三节　蛋白质免疫印迹技术81

第四节　DNA序列测定84

第五节　转基因动物技术和基因打靶技术87

第六节　DNA芯片技术89

第七节　mRNA差异显示技术89

第一节　神经细胞及神经胶质细胞的显示方法92

第七章　神经细胞化学显示技术与观察工具92

第二节　神经通路示踪法99

第三节　神经形态学观察工具102

第八章　核医学研究技术方法110

第一节　应用于神经生物学的核素示踪技术方法简介110

第二节　脑血流灌注显像技术113

第三节　脑代谢功能的核素显像技术115

第四节　脑内神经递质受体的核素显像技术117

第五节　脑灌注显像介入试验121

第六节　其他显像技术129

第九章　脑功能磁共振成像技术方法131

第一节　磁共振成像原理131

第二节　脑功能磁共振成像研究方法132

第三节　MRS在中枢神经系统疾病中的应用135

第四节　脑功能磁共振成像的原理及其基础研究和临床应用136

第五节　脑磁图的临床应用137

第六节　磁共振显微成像137

第十章　计算机科学技术138

第一节　计算神经科学——理论神经科学与实验神经科学联姻138

第二节　计算机技术与生物信号记录分析系统简介139

第三节　计算机图像分析系统简介142

下篇　神经生物学研究中的多层次、多水平实验150

Ⅰ　整体行为水平的实验150

第十一章　躯体感觉及其传入150

实验一　蜚蠊（蟑螂）躯体对机械刺激的感受150

实验二　蜚蠊腹神经索的自发和诱发放电反应153

实验三　躯体刺激对大鼠脊髓背角广动力细胞电活动的影响157

实验四　对家兔中脑网状结构神经元单位放电的观察159

实验五 中缝核群神经元单位放电161

实验六　窒息对大鼠大脑皮层诱发电位的影响163

第十二章　视、听觉及其传入167

实验一　蛙视网膜电图的观察167

实验二　耳蜗微音器效应与听神经动作电位记录169

实验三　视觉中枢单个神经元对视觉刺激的反应171

第十三章　反射性行为174

实验一　脊髓反射与反射回路174

实验二　脊髓横断与脊休克176

实验三　大鼠大脑皮质运动控制表征区定位177

实验四　姿势、平衡与前庭、小脑180

实验一　青蛙的视动反应行为的观察183

第十四章　感觉反应性行为183

实验二　苍蝇的味觉感受与摄食行为184

实验三　大鼠下丘脑毁损后体重的改变186

实验四 节肢动物变色反应的神经体液调节190

第十五章　痛反应性行为192

实验一　坐骨神经损伤性痛194

实验二　镇痛药的抗灼热性痛反应的效应197

实验三　吗啡对福尔马林致痛大鼠的镇痛作用200

实验四　芬太尼对内脏痛的镇痛作用202

实验一　条件性和非条件性逃避行为205

第十六章　学习与记忆205

实验二　空间、工作记忆以及辨别能力的获得208

实验三　大鼠吗啡成瘾性（条件性）位置偏爱212

实验四　大鼠下丘脑隔核的慢性自我刺激214

实验五 大鼠海马的LTP217

Ⅱ　细胞水平的实验222

第十七章　神经组织细胞普通染色方法222

实验一　Golgi-Cox法显示神经元222

实验二　灌注的快速Golgi法223

实验三 Cajal氏氯化金升汞法显示星状胶质细胞225

实验四　Marchalls法显示胶质细胞226

实验五　神经元细胞的尼氏体染色法227

实验六　神经纤维与轴索的Holmes镀银法228

实验七　髓鞘的染色（Pal-Weigert法）230

第十八章　神经通路示踪法232

实验一　辣根过氧化物酶（HRP）追踪法232

实验二　荧光素追踪法235

实验三　放射性核素示踪法238

实验四　神经纤维溃变与终末嗜银追踪法244

第十九章　神经细胞的免疫组织化学技术247

实验一　PAP法248

实验二　ABC法251

第二十章　神经组织细胞的多重标记技术253

实验一　神经组织细胞的多重标记技术253

第二十一章　神经细胞分散培养技术259

实验一　大鼠皮质细胞分散培养技术259

第二十二章　神经细胞凋亡检测方法264

实验一　原位末端标记检测法（DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移）265

实验二　原位末端标记检测法（TdT介导的dUTP缺口末端标记技术）267

实验三　细胞凋亡的流式细胞仪检测法一（AnnexinV-PI双染色法）269

实验四　细胞凋亡的流式细胞仪检测法二（活化的Caspase-3荧光染色法）271

第二十三章　神经、肌肉电活动的记录273

实验一　骨骼肌纤维的静息电位与动作电位273

实验二　肌被动张力变化与肌梭放电的同步记录278

实验三　离体脊神经节细胞电活动的细胞内记录282

实验四 神经干复合动作电位的记录285

实验五　容积传导——神经冲动的电位场记录289

实验六　神经-肌肉标本电活动和肌肉张力的同步记录291

实验一　颈上神经节细胞膜钙通道电流的记录296

第二十四章　离子通道电流的记录296

Ⅲ 分子水平的实验296

实验二　大鼠初级感觉神经元的全细胞膜片钳记录301

实验三　Baclofen对大鼠海马分离细胞GABA-激活电流的影响305

实验四　非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP受体激活电流的记录308

第二十五章　神经递质释放的采集、分析、测定与组织化学显示技术313

实验一　推挽灌流法313

实验二　微透析法316

实验三　氨基酸递质HPLC分析的荧光法321

实验四　单胺类递质HPLC分析的电化学法324

实验五 脑组织中5-HT、5-HIAA、NE和DA的同时提取和荧光分析325

实验六　生物胺的荧光组织化学显示329

实验七　颈上神经节三磷酸腺苷释放的荧光素-荧光素酶测定332

实验八　神经肽的放射免疫测定335

实验九　乙酰胆碱酯酶活性的测定与显示——Karnovsky-Roots亚铁氰化铜直接显色法342

实验十一　氧化氮合酶的组织化学显示344

第二十六章　神经信息物质生物效应的测定及其受体亚型的鉴定347

实验一　乙酰胆碱对骨骼肌的作用与生物测定347

实验二 乙酰胆碱的舒血管效应与血管内皮细胞352

实验三　吗啡样生物活性肽的测定与受体亚型的鉴定355

实验一　阿片受体的放射配体结合分析法358

第二十七章　受体分析与放射自显影技术358

实验二　受体放射自显影法362

第二十八章　第二信使及其激酶的测定与组织化学显示技术365

实验一　cAMP含量的放射免疫测定365

实验二　蛋白竞争结合法测定cAMP368

实验三　特异受体结合法测定1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）含量371

实验四　细胞内钙离子浓度变化的实时检测373

第二十九章　神经系统的原位杂交376

实验一　神经系统的原位杂交376

参考文献386