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第一篇 基础实验1

第一章 医学细胞生物学基本实验1

第一节 细胞的显微结构1

实验一 细胞的一般形态结构观察1

实验二 细胞的显微测量技术6

第二节 细胞生理活动8

实验三 胞质环流8

实验四 细胞吞噬9

实验五 细胞活性鉴定11

实验六 细胞融合12

第三节 细胞化学成分的显示14

实验七 普通细胞化学15

实验八 核酸细胞化学21

实验九 酶细胞化学25

实验十 荧光细胞化学与免疫荧光细胞化学28

第四节 细胞增殖34

实验十一 无丝分裂34

实验十二 有丝分裂35

实验十三 减数分裂39

实验十四X染色质标本制备与观察42

实验十五 早熟染色体凝集的诱导和观察43

第五节 细胞培养46

实验十六 原代细胞培养47

实验十七 细胞传代培养49

实验十八 体外培养细胞的观察方法53

第二章 医学生物化学基本实验59

第一节 蛋白定量分析实验59

实验一 双缩脲法测定蛋白质含量59

实验二Folin-酚试剂法测定蛋白质含量60

实验三 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量61

实验四 紫外分光光度法测定蛋白质含量62

第二节 层析分离纯化实验64

实验五 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定64

实验六 葡聚糖凝胶分离血红蛋白和DNP-胰糜蛋白酶混合液67

实验七 离子交换层析分离混合氨基酸68

第三节 电泳分析实验69

实验八 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳69

实验九 血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳71

实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶72

实验十一SDS-PAGE测定蛋白质分子量75

实验十二 等电聚焦法测定蛋白质等电点77

第四节 酶学实验79

实验十三pH对酶促反应速度的影响79

实验十四 温度对酶促反应速度的影响82

实验十五 底物浓度对酶促反应速度的影响83

实验十六 抑制剂对酶促反应速度的影响85

实验十七 酶的提取及比活性测定87

第五节 物质代谢实验92

实验十八 胰岛素对血糖含量的影响92

实验十九 邻甲苯胺法测血糖含量92

实验二十 糖酵解中间产物的鉴定93

实验二十一 血清中谷丙转氨酶活性的测定95

实验二十二 血清脂类含量分析97

第三章 医学分子生物学基本实验100

第一节 基因克隆实验100

实验一 质粒DNA的限制性酶切反应101

实验二 琼脂糖凝胶电泳分离鉴定酶切的线性DNA片段104

实验三DNA酶切片段的回收107

实验四DNA片段的体外连接109

实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备111

实验六 重组DNA的转化及阳性克隆的初步筛选112

实验七 阳性重组子的鉴定114

实验八 碱裂解法质粒DNA的小量制备115

实验九 质粒DNA浓度和纯度的测定117

第二节 外源基因GFP在原核细胞中的诱导表达和纯化117

实验十 外源基因在大肠杆菌的诱导表达和提取118

实验十一 亲和层析法纯化重组蛋白119

实验十二SDS-PAGE鉴定重组蛋白质119

第三节 PCR技术121

实验十三PCR扩增目的基因123

实验十四总RNA提取及RT-PCR扩增目的基因124

实验十五 实时定量PCR分析真核基因的表达128

第四章 医学遗传学基本实验130

第一节 细胞遗传学实验130

实验一 人类外周血淋巴细胞培养130

实验二 人类外周血淋巴细胞染色体的制备131

实验三 人类染色体G显带133

实验四 人类G显带染色体核型分析134

实验五 姐妹染色单体交换（SCE）标本的制备与观察136

第二节 分子遗传学实验138

实验六 短串联重复序列（STR）的多态性分析138

实验七 限制性片段长度多态（RFLP）分析143

实验八 单链构象多态性（SSCP）的检测145

第三节 人类遗传性状分析148

实验九 遗传性状基因型与表型分析148

实验十 遗传病的家系分析和再发风险估计151

第二篇 综合实验153

第五章 细胞增殖活力分析153

第一节 细胞增殖的定量分析153

实验一 细胞琥珀酸脱氢酶活性检测（MTT法）153

实验二 细胞周期的检测154

第二节 细胞内ATP含量测定155

实验三 人淋巴细胞ATP活力检测155

第三节 细胞增殖的染色分析156

实验四BrdU染色法检测细胞增殖156

实验五Ki-67免疫染色法检测细胞增殖157

第六章 细胞凋亡的诱导与检测160

第一节 细胞凋亡的诱导与形态结构观察160

实验一 培养细胞的凋亡诱导161

实验二 锥虫蓝染色检测凋亡细胞162

实验三 苏木精-伊红染色检测凋亡细胞163

实验四Giernsa染色检测凋亡细胞164

实验五 吖啶橙荧光染色检测凋亡细胞165

实验六Ho.33342与PI荧光双染检测凋亡细胞165

第二节 凋亡细胞的超微结构观察167

实验七 透射电镜观察凋亡细胞167

实验八 扫描电镜观察凋亡细胞168

第三节 凋亡细胞的定量分析169

实验九 流式细胞术检测凋亡细胞169

第四节 细胞凋亡的分子生物学特征171

实验十 凋亡细胞DNA ladder检测172

实验十一Caspase 3酶活性测定172

实验十二 凋亡相关蛋白表达水平检测173

实验十三 凋亡相关基因转录水平的表达检测174

第七章 细胞自噬与相关分析178

第一节 细胞自噬的形态学分析178

实验一 透射电镜观察自噬体的形成179

实验二GFP-LC3自噬斑点的荧光显微镜检测180

第二节 自噬标志蛋白的表达分析181

实验三 蛋白质印迹法检测自噬标志蛋白的变化181

第八章 真核生物基因表达调控分析183

实验一 甲基化特异性PCR （MSP）检测基因启动子甲基化183

实验二 荧光素酶报告基因瞬时转染分析启动子活性186

第九章 四氯化碳致培养肝细胞损伤的分析193

第一节 培养肝细胞损伤模型的诱导与形态学分析193

实验一 肝细胞损伤的诱导及常规形态检查193

实验二 损伤细胞的脂肪变性检测194

第二节 肝细胞损伤的定量分析195

实验三CCK法检测细胞存活率196

第三节 损伤肝细胞相关酶的分析197

实验四 肝损伤细胞乳酸脱氢酶活性检测198

实验五 肝损伤细胞谷丙转氨酶活性检测199

实验六 肝细胞中PPAR γ1表达水平的检测201

第十章 人遗传性状基因的分子诊断与应用201

实验一Duchenne型肌营养不良的基因诊断201

实验二 多重RT-PCR检测染色体易位202

实验三 利用短串联重复序列进行亲权鉴定205

第三篇 创新实验207

实验一 糖尿病的生化及遗传检测分析实验207

实验二 唐氏综合征的产前诊断方法208

实验三 家族性高胆固醇血症的诊断方法208

实验四 血友病的诊断210

实验五 重组人促红细胞生成素在细胞中的表达、分离和纯化210

实验六 p53基因与肿瘤相关性实验设计211

实验七 小鼠组织细胞形态及功能分析212

实验八 小鼠组织特种细胞的形态及特征性成分的鉴定212

附录213

附录一 实验室规则213

附录二 实验室安全及防护213

附录三 实验室常用玻璃仪器的洗涤与清洁214

附录四 生物绘图的要求与方法217

附录五 生物学实验设计报告218

附录六 常用实验技术原理218