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第1部分 显微镜技术1

1.1 光学显微镜技术1

1.1.1 普通光学显微镜的构造原理及使用方法1

1.1.2 特殊显微镜的原理和使用7

1.1.3 激光扫描共聚焦显微镜技术13

1.1.4 光学显微标本的制作技术18

1.2 电子显微镜技术26

1.2.1 透射电子显微镜26

1.2.2 透射电子显微镜样品制备29

1.2.3 扫描电子显微镜35

1.2.4 扫描电子显微镜样品制备39

第2部分 细胞亚显微结构的分离和观察44

2.1 细胞形态结构及显微测量44

2.2 线粒体和液泡系的活体染色45

2.3 细胞器的分级分离48

2.4 细胞器的连续密度梯度离心制备与观察49

2.5 植物细胞骨架的光学显微镜观察52

2.6 动物细胞骨架的间接免疫荧光显示54

2.7 细胞骨架的考马斯亮蓝法观察55

第3部分 细胞生理学技术58

3.1 细胞膜的通透性58

3.2 细胞凝集反应60

3.3 用荧光脂质进行细胞活体染色61

3.4 台盼蓝染色法鉴定细胞生死状态63

3.5 小鼠巨噬细胞吞噬的观察65

3.6 胞饮作用68

3.7 细胞膜钠通道的膜片钳记录69

3.8 细胞计数74

第4部分 细胞结构与化学成分的检测技术77

4.1 DNA的细胞化学——Feulgen反应77

4.2 RNA的细胞化学——Brachet反应79

4.3 细胞多糖的PAS反应80

4.4 细胞中过氧化物酶的显示方法82

4.5 细胞中酸性磷酸酶的显示方法84

4.6 细胞中碱性磷酸酶的定位86

4.7 细胞膜蛋白、细胞浆蛋白和细胞核蛋白及总蛋白的提取88

4.8 蛋白质的亚细胞定位（GFP报告基因融合法）93

4.8.1 某动物基因编码蛋白的细胞定位实验94

4.8.2 某植物基因编码蛋白的细胞定位实验95

4.9 植物细胞中碱性蛋白与总蛋白的定位与观察97

第5部分 细胞培养与细胞工程技术99

5.1 植物原生质体的分离、培养与融合99

5.2 胎鼠肝细胞的原代培养101

5.3 神经胶质细胞的培养105

5.4 胎鼠肝细胞的传代培养107

5.5 细胞融合109

5.6 细胞的冻存与复苏111

5.7 细胞转染113

第6部分 染色体的观察117

6.1 Feulgen染色观察有丝分裂117

6.2 青蛙骨髓细胞染色体标本的制备与观察119

6.3 人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备121

6.4 人类染色体G带显带技术125

6.5 染色体核仁组织区的显示126

第7部分 细胞重大生命活动的研究128

7.1 细胞生长、细胞分裂与细胞周期128

7.1.1 细胞毒和细胞活力测定128

7.1.2 小鼠M期染色体的制备与观察133

7.1.3 动物细胞中早熟染色体凝集的诱导和观察135

7.1.4 细胞同步化137

7.1.5 细胞周期的流式细胞仪检测140

7.2 细胞分化142

7.2.1 植物细胞的脱分化与再分化142

7.2.2 血细胞的分化和不同类型血细胞的观察144

7.3 细胞凋亡147

7.3.1 细胞凋亡的形态学观察147

7.3.2 细胞凋亡的DNA ladder检测150

7.3.3 细胞凋亡的流式细胞仪检测152

7.3.4 线粒体膜电位检测细胞凋亡154

附录157

附录A 常用染料及染色剂配制157

附录B 常用细胞固定液165

附录C 封片剂和粘贴剂170

附录D 常用缓冲液的配制171

附录E 常用培养基的配制179

附录F 器械的清洗与消毒187

附录G 光学仪器的保养与清洁189

附录H 常用的单位换算191

附录1 实验室常用技术参数192

附录J 常用实验动物的血液生理生化195

参考文献204