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第一篇 显微镜技术2

第一章 光学显微镜及其使用2

实验一 普通光学显微镜及其使用2

实验二 特殊光学显微镜及其使用6

Ⅰ．暗视野显微镜7

Ⅱ．相差显微镜8

Ⅲ．偏振光显微镜10

Ⅳ．微分干涉差显微镜12

Ⅴ．荧光显微镜14

实验三 激光扫描共聚焦荧光显微镜和双光子激光扫描荧光显微镜18

Ⅰ．激光扫描共聚焦荧光显微镜18

Ⅱ．双光子激光扫描荧光显微镜21

第二章 电子显微镜及其使用27

实验四 透射电子显微镜术27

Ⅰ．透射电子显微镜的原理与操作27

Ⅱ．透射电子显微镜超薄切片样品制备31

实验五 扫描电子显微镜术43

Ⅰ．扫描电子显微镜的原理、用途与使用方法43

Ⅱ．扫描电子显微镜样品制备46

第二篇 基础性实验52

第三章 细胞形态结构和生理活动52

实验六 细胞显微结构观察52

实验七 细胞器的活体染色与观察54

Ⅰ．高尔基体活体染色与观察56

Ⅱ．内质网活体染色与观察57

Ⅲ．液泡和溶酶体活体染色与观察57

Ⅳ．线粒体活体染色与观察58

Ⅴ．细胞核活体染色与观察59

实验八 植物液泡观察、分离纯化及H＋-ATPase活力测定60

实验九 叶绿体的分离、纯化及荧光观察64

实验十 细胞骨架组分的荧光标记定位67

Ⅰ．微丝的直接荧光标记定位67

Ⅱ．微管的间接免疫荧光定位70

实验十一 细胞膜的渗透性73

实验十二 细胞凝集反应75

实验十三 细胞生死状态的鉴别78

实验十四 细胞自噬的诱导及检测82

实验十五 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能检测86

实验十六 植物内源H2S、NO和ROS的原位检测89

第四章 细胞分裂与染色体分析93

实验十七 动物细胞有丝分裂及染色体标本制备93

实验十八 植物细胞有丝分裂及染色体标本制备96

Ⅰ．常规压片法制备植物细胞染色体标本97

Ⅱ．去壁-低渗火焰干燥法制备植物细胞染色体标本99

实验十九 人外周血淋巴细胞培养及其染色体分带与核型分析101

实验二十 人类染色单体色差分析技术105

实验二十一 荧光原位杂交定位108

Ⅰ．端粒序列的荧光原位杂交108

Ⅱ．5S、18S rDNA和SSR在黑麦中期染色体上的荧光原位杂交111

实验二十二 减数分裂观察与染色体标本制备114

Ⅰ．植物花粉母细胞减数分裂观察114

Ⅱ．动物生殖细胞减数分裂观察与染色体标本制备117

实验二十三 细胞分裂异常与染色体畸变120

Ⅰ．植物细胞分裂异常与染色体畸变120

Ⅱ．肿瘤细胞有丝分裂异常与染色体畸变123

第三篇 综合性与设计性实验128

第五章 细胞培养与细胞工程128

实验二十四 植物组织培养（设计性实验）128

实验二十五 动物细胞培养132

实验二十六 体外培养细胞的冻存、复苏和活力测定137

实验二十七 细胞计数与计量140

Ⅰ．用台盼蓝排染法进行细胞计数141

Ⅱ．用MTT法进行细胞计量142

Ⅲ．用SRB法进行细胞计量143

实验二十八 培养细胞生长曲线绘制和有丝分裂指数的测定145

Ⅰ．细胞生长曲线的测定146

Ⅱ．培养细胞有丝分裂指数的测定147

实验二十九 细胞迁移分析——划痕实验（设计性实验）149

实验三十 动物细胞融合152

实验三十一 小鼠胚胎干细胞培养及体外诱导分化155

实验三十二 动物细胞显微注射技术159

第六章 细胞周期与细胞凋亡164

实验三十三 动物细胞周期检测164

实验三十四 细胞同步化166

实验三十五 植物细胞周期检测169

实验三十六 植物根尖细胞有丝分裂高频同步化诱导172

实验三十七 抗癌药物对肿瘤细胞增殖的影响（设计性实验）174

实验三十八 细胞凋亡的诱导、形态学观察及生化特征检测（设计性实验）178

Ⅰ．细胞凋亡的诱导与形态学观察178

Ⅱ．细胞凋亡的生化特征检测181

实验三十九 单细胞凝胶电泳检测细胞中DNA链的断裂183

第七章 细胞的遗传转化、基因编辑及蛋白质互作187

实验四十 哺乳动物细胞转染技术187

实验四十一 植物原生质体的分离及外源基因的瞬时表达189

实验四十二 GUS和GFP报告基因在植物组织中的表达及其检测192

实验四十三 哺乳动物细胞基因的定向敲除——CRISPR-Cas9技术195

实验四十四 蛋白质分子互作的体外检测——酵母双杂交技术201

实验四十五 细胞内蛋白质分子互作检测——双分子荧光互补技术205

附录210

附录1 细胞生物学实验室注意事项210

附录2 实验报告的书写要求211

附录3 实验室器具的清洁和灭菌214

附录4 显微镜物镜常用的一些符号说明215

附录5 离心机转数与离心力换算表及公式217

附录6 试剂浓度的表示法及其计算218

附录7 部分动、植物及人的染色体数目220

附录8 常用缓冲液的配制221

附录9 荧光染料参数226

附录10 细胞器常用特异荧光探针和抗原229

附录11 常用培养用液的配制230

附录12 常用细胞生物学词汇233