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上篇 免疫学实验室设备和管理3

第一章 实验室一般介绍3

第一节 开设医学免疫学实验的目的3

第二节 实验室规则3

第三节 实验室的安全防护4

第四节 常用实验器材的清洁及准备5

第五节 水的纯化7

第六节 无菌操作的基本要领7

第二章 实验室常用仪器设备介绍9

下篇 免疫学实验技术23

第三章 非特异性免疫检测23

第一节 吞噬细胞功能检测23

实验一 中性粒细胞吞噬细胞功能检测23

实验二 中性粒细胞活性检测24

实验三 巨噬细胞吞噬功能测定25

实验四白细胞杀菌功能测定26

第二节NK细胞功能测定29

实验五NK细胞功能测定29

第三节 非特异性免疫功能检测31

实验六 血脑屏障作用31

实验七溶菌酶测定32

第四章 抗原-抗体反应34

第一节 凝集试验34

实验八直接凝集试验34

实验九 间接凝集试验37

实验十间接凝集抑制试验43

实验十一 协同凝集试验45

第二节 沉淀反应47

实验十二 单向免疫扩散试验47

实验十三 双向免疫扩散48

实验十四 免疫电泳50

实验十五 火箭免疫电泳51

实验十六 免疫浊度测定53

实验十七 对流免疫电泳试验54

第三节 补体参与的抗原抗体反应56

实验十八 补体结合试验56

第五章 淋巴细胞检测59

第一节T淋巴细胞功能检测59

实验十九 外周血单个核细胞的分离59

实验二十E花环形成试验61

实验二十一T淋巴细胞转化试验63

实验二十二 细胞毒性T细胞功能测定66

实验二十三T细胞亚群的测定68

实验二十四 白细胞趋化实验70

第二节B细胞功能检测72

实验二十五 细胞内免疫球蛋白的检测72

实验二十六溶血空斑试验73

实验二十七 溶血分光光度测定法74

第六章 常用免疫标记技术75

第一节 免疫荧光染色技术75

实验二十八 荧光抗体的制备75

实验二十九 免疫荧光染色技术77

第二节 免疫酶标技术80

实验三十 酶标抗体的制备80

实验三十一 酶联免疫吸附试验81

实验三十二 定性酶联免疫吸附试验82

实验三十三 定量酶联免疫吸附试验84

实验三十四 生物素-酶标记亲和素系统85

第三节 放射免疫分析技术87

实验三十五3H-胸腺嘧啶核苷检测技术87

第七章 免疫分子的检测89

第一节 细胞表面分子的检测89

实验三十六 细胞表面抗原的检测89

实验三十七 细胞膜受体的检测90

实验三十八 细胞黏附分子的测定91

第二节 细胞因子的检测技术95

实验三十九 白细胞介素1检测95

实验四十 白细胞介素2检测98

实验四十一 白细胞介素3检测100

实验四十二 白细胞介素4检测101

实验四十三 白细胞介素5检测102

实验四十四 白细胞介素6检测103

实验四十五 白细胞介素8检测104

实验四十六 肿瘤坏死因子的生物活性检测105

实验四十七GM-CSF的活性检测106

实验四十八 干扰素检测107

实验四十九趋化性细胞因子的检测108

第三节 血清补体、Ig检测112

实验五十 血清总补体活性测定112

实验五十一 血清总IgE测定114

实验五十二 循环免疫复合物测定115

实验五十三 放射过敏原吸附技术116

第八章 超敏反应检测118

实验五十四豚鼠过敏反应试验118

实验五十五 皮肤过敏反应试验119

实验五十六 皮肤迟发型超敏反应试验120

第九章 抗体的制备122

第一节 单克隆抗体技术122

实验五十七B淋巴细胞杂交瘤技术122

实验五十八 人单克隆抗体的制备127

第二节 双特异性抗体的制备132

实验五十九 双特异性抗体的制备132

第三节 抗血清的制备135

实验六十 溶血素的制备135

实验六十一 兔抗人血清的制备136

实验六十二 抗血清的纯化137

第十章 基因工程抗体141

实验六十三 嵌合抗体的制备141

实验六十四 单链抗体的制备145

实验六十五 噬菌体抗体库技术148

第十一章 免疫细胞化学技术154

第一节 与免疫细胞化学相关的组织学和细胞学技术154

实验六十六 组织和细胞标本的取材和制备154

第二节 免疫酶细胞化学技术159

实验六十七 酶标抗体免疫细胞化学染色法159

实验六十八 非标记抗体免疫酶细胞化学染色法161

第三节 免疫荧光细胞化学技术168

实验六十九 免疫荧光细胞化学的染色方法168

第四节 亲和组织化学技术172

实验七十 生物素-亲和素免疫细胞化学技术172

实验七十一 葡萄球菌蛋白A技术175

实验七十二 凝集素组织化学技术176

第五节 免疫金银技术178

实验七十三 胶体金的制备178

实验七十四 免疫金染色法179

实验七十五 免疫金银法180

实验七十六 彩色免疫金银法181

第六节 免疫胶体铁细胞化学技术182

实验七十七 免疫胶体铁细胞化学技术182

第十二章 免疫印迹184

实验七十八 可提取性核抗原（ENA）抗体的检测189

实验七十九 重组Follistatin的表达检测190

第十三章 分子生物学部分试验192

实验八十 质粒DNA制备192

实验八十一 质粒DNA的提取193

实验八十二DNA限制性内切酶消化195

实验八十三DNA琼脂糖电泳195

实验八十四DNA连接、转化196

实验八十五 聚合酶链反应（PCR）试验197

实验八十六Southern印迹杂交199

附录209

附录Ⅰ基因工程疫苗209

附录Ⅱ免疫学实验常用试剂的配制214

附录Ⅲ离心速度、相对离心力和离心时间的计算227

附录Ⅳ加样器的校准228

附录Ⅴ实验动物的管理230

参考文献232