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第一篇 生物化学实验总论1

一、生物化学实验的目的1

二、生物化学实验的基本内容1

三、生物化学实验课的要求2

四、生物化学实验报告的书写规则2

五、生物化学实验室规则2

第二篇 常用生物化学实验技术及原理第一章　电泳技术4

一、电泳的基本原理4

二、影响电泳的因素5

三、电泳的分类6

四、常用的电泳技术7

第二章　层析技术11

一、层析的基本原理11

二、层析的分类11

三、常用的层析技术12

第三章　比色分析技术17

一、比色分析的基本原理17

二、影响比色分析的因素17

三、比色分析的分类18

四、分光光度技术的应用19

第四章　离心技术24

一、离心技术的基本原理24

二、制备性离心技术的基本原理24

三、离心机的分类24

四、电动式离心机的使用方法25

第三篇 学生实验26

第一章　基础性实验26

实验一 凯氏微量定氮法测定血清蛋白质含量26

实验二 Folin-酚法测定血清蛋白质含量32

实验三 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳34

实验四 酶的专一性及影响酶活性的因素37

实验五 酵母蔗糖酶米氏常数的测定40

实验六　2,4-二硝基苯肼比色法测定维生素C含量44

实验七 胡萝卜素的提取、纯化与定性分析47

实验八　红细胞糖酵解的测定49

实验九　吴宪-Folin法测定血糖含量52

实验十 肝中酮体生成作用55

实验十一 LRC改良法测定血清总胆固醇含量57

实验十二 磷钨酸-镁沉淀法测定血清高密度脂蛋白胆固醇含量59

实验十三 血清甘油三酯含量的测定62

实验十四 纸层析法测定肝组织的转氨基作用64

实验十五 二乙酰一肟显色法测定血清尿素氮67

第二章　综合性实验70

实验一 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（核黄素-TEMED聚合系统）70

实验二　琼脂糖凝胶电泳法分离血清脂蛋白75

实验三 血清γ-球蛋白的提纯与鉴定78

实验四 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量84

实验五 琼脂糖凝胶电泳法分离血清LDH同工酶及LDH活性的测定88

实验六　核酸的提取与鉴定94

实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化和质粒DNA的提取与鉴定101

实验八　PCR基因扩增108

实验九 动物肝脏细胞核的分离与鉴定116

第三章　研究性实验119

实验一 重组表达质粒的PCR鉴定119

实验二 外源基因在大肠杆菌中诱导表达的研究121

实验三 大肠杆菌热休克蛋白表达的临界温度研究122

实验四 质粒纯化方法的优化123

第四篇 附录125

一、实验报告范例125

二、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制方法128

三、常见市售酸碱的相对密度和浓度129

四、常用缓冲液的配制130

五、硫酸铵饱和度的常用表135

参考文献137