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第一部分 酚氧化酶研究概述3

第一章 酚氧化酶及昆虫酚氧化酶概况3

第一节 酚氧化酶概况3

1.1.1酚氧化酶的起源3

1.1.2酚氧化酶的组织定位4

1.1.3酚氧化酶的分子生物学研究5

1.1.4酚氧化酶活性中心结构8

1.1.5酚氧化酶的催化氧化10

第二节 昆虫酚氧化酶12

1.2.1酚氧化酶在昆虫体内的存在及激活12

1.2.2酚氧化酶在昆虫体内的生理功能13

1.2.3酚氧化酶抑制剂的研究15

1.2.4酚氧化酶抑制剂在害虫控制领域的前景16

参考文献17

第二章 昆虫酚氧化酶分离纯化及活性测定技术20

第一节 昆虫酚氧化酶分离纯化基本技术20

2.1.1绪言20

2.1.2酶源材料的制备与分离纯化一般步骤20

2.1.3凝胶层析法21

2.1.4离子交换层析法24

2.1.5亲和层析法25

第二节 昆虫酚氧化酶的分离纯化、纯度鉴定及活性测定26

2.2.1绪言26

2.2.2菜青虫幼虫的酚氧化酶分离纯化步骤27

2.2.3麻蝇蛹酚氧化酶的分离纯化步骤27

2.2.4聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定昆虫酚氧化酶纯度28

2.2.5昆虫酚氧化酶活力测定方法30

参考文献32

第三章 昆虫酚氧化酶抑制动力学研究方法与技术33

第一节 酶促反应的基础动力学33

3.1.1米氏方程推导33

3.1.2米氏方程的意义34

3.1.3 Km和Vm的求取35

第二节 环境因素对酶活力的影响36

3.2.1温度与酶活力36

3.2.2 p H与酶活力37

3.2.3底物浓度对酶活力的影响38

3.2.4金属离子对酶活力的影响38

3.2.5有机溶剂对酶活力的影响39

第三节 酶抑制动力学39

3.3.1可逆与不可逆抑制作用的区分40

3.3.2竞争性抑制作用41

3.3.3非竞争性抑制作用43

3.3.4反竞争性抑制作用44

参考文献45

第四章 昆虫酚氧化酶抑制剂结构与活性的关系46

第一节 构效关系研究概述46

4.1.1二维定量构效关系方法46

4.1.2三维定量构效关系方法49

4.1.3 2D-QSAR、 3D-QSAR与数据库相结合55

第二节 材料与方法56

4.2.1供试化合物56

4.2.2 2D-QSAR法56

4.2.3 3D-QSAR法59

第三节 酚氧化酶抑制剂2D-QSAR60

4.3.1取代基效应对苯甲醛、苯甲酸或苯甲醛缩氨基硫脲及它们的衍生物对酚氧化酶的抑制活性的影响60

4.3.2取代基效应对苯甲酸及其衍生物和苯甲醛缩氨基硫脲及其衍生物对菜青虫酚氧化酶抑制活性的影响64

4.3.3取代基效应对苯甲醛及其衍生物和苯甲醛缩氨基硫脲及其衍生物对菜青虫酚氧化酶的抑制活性的影响65

第四节 酚氧化酶抑制剂3D-QSAR67

4.4.1 3D-QSAR模型的建立67

4.4.2 CoMFA模型71

4.4.3 CoMSIA模型72

参考文献73

第二部分 研究论文77

专题一 昆虫酚氧化酶基本特性研究77

菜青虫不同虫态及虫龄的多酚氧化酶性质比较77

甜菜夜蛾多酚氧化酶特性及曲酸等抑制剂抑制作用研究86

槐尺蠖多酚氧化酶的部分纯化及酶学特征94

Enzymatic Properties of Phenoloxidase from Pieris rapae （Lipidoptera）Larvae103

专题二 昆虫酚氧化酶抑制剂活性与抑制动力学研究113

芹菜素等三种生物源化合物对甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制作用113

几种苯甲酸类化合物对甜菜夜蛾多酚氧化酶活性的影响120

Inhibitory Effects of Kojic Acid on Phenoloxidase of Diamondback Moth Plutella xylostella128

Inhibitory Effects of 4-Dodecylresorcinol on the Phenoloxidase of the Diamondback Moth Plutella xylostella （L.）（Lepidoptera Plutel-lidae）139

Inhibitory Effects of Apigenin on Phenoloxidase of Diamondback Moth，Plutella xylostella （Lepidoptera Plutellidae）150

栎皮酮对甜菜夜蛾酚氧化酶抑制作用研究162

铜铁试剂对菜青虫多酚氧化酶的抑制作用171

5，7，4′-三羟基黄酮等生物源化合物对菜青虫幼虫生长发育的影响180

Inhibition Kinetics of Cabbage Butterfly （Pieris rapae L.）Larvae Phe-noloxidase Activity by 3-Hydroxy-4-Methoxybenzaldehyde Thiosemic-arbazone188

Inhibitory Effects of Schiff Analogs of Salicylidene Aniline on Pheno-loxidase from Pieris rapae L.（Lepidoptera： Pieridae）205

2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺对菜青虫酚氧化酶的抑制作用218

Inhibitory Effects of 2-Hydroxybenzaldehyde on the Activity of Phenolo-xidase from Pieris rapae （Lipidoptera） Larvae230

专题三 昆虫酚氧化酶抑制剂结构与活性关系研究246

3D-QSAR and Molecular Docking Studies of Benzaldehyde Thiosemica-rbazone， Benzaldehyde， Benzoic Acid， and Their Derivatives as Pheno-loxidase Inhibitors246

Quantitative Structure-Activity Relationship Studies of Mushroom Tyr-osinase Inhibitors264

2D-QSAR Studies of Benzaldehyde， Benzoic acid， Benzaldehyde Thiosemica-rbazone， and their Derivatives as Insect Phenoloxidase Inhibitors281

专题四 昆虫酚氧化酶与害虫免疫及抗药性的关系研究293

槲皮素对黄粉虫血淋巴酚氧化酶的生理效应293

Does Phenoloxidase Contributed to the Resistance？ Selection with Butane-Fipronil Enhanced its Activities from Diamondback Moths303

专题五 昆虫酚氧化酶部分抑制剂的合成研究315

取代水杨醛席夫碱的合成及其对昆虫酚氧化酶的抑制活性315

取代苯甲醛缩氨基硫脲的合成及其对昆虫酚氧化酶的抑制活性321

α-巯基-β-取代苯基丙烯酸的合成及其对昆虫酚氧化酶的抑制活性327