PCR最新技术原理、方法及应用2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

PCR最新技术原理、方法及应用PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一章　绪论1

第一节　PCR发展简史1

目录1

第二节　PCR技术的基本原理和操作2

一、PCR的基本原理2

二、PCR的基本成分2

三、PCR的基本操作4

第三节　PCR的主要应用5

一、基础研究方面的应用5

二、PCR在临床上的应用6

三、在法医学中的应用7

参考文献8

第一节 常规RT-PCR9

一、引言9

第二章　反转录PCR9

二、原理10

三、方法10

四、注意事项12

五、应用15

第二节 一步RT-PCR18

一、引言18

二、原理18

三、方法19

四、应用20

第三节 多标志物RT-PCR21

一、引言21

二、原理22

三、方法22

四、应用22

三、方法23

二、原理23

第四节 反转录-快速PCR23

一、引言23

四、应用24

第五节 反向连接介导的PCR24

一、引言24

二、原理25

三、方法25

四、应用26

参考文献27

第六节　RNA-PCR29

一、引言29

二、原理29

三、直接PCR29

五、注意事项31

四、两步PCR31

六、应用32

七、小结34

参考文献34

第三章　扩增已知序列两侧DNA的PCR35

第一节　反向PCR35

一、引言35

二、基本原理35

三、材料35

四、方法36

五、注意事项37

六、应用38

七、小结41

参考文献41

二、原理42

一、引言42

第二节 锚定PCR42

三、用连接锚定PCR从基因文库中扩增巴知基因侧翼序列44

四、用互补锚定PCR直接扩增已知序列侧翼cDNA序列45

五、问题及对策49

六、小结50

参考文献50

第三节 RACE——cDNA末端的快速扩增50

一、引言50

二、RACE基本原理51

三、实验方案53

四、RACE的应用56

五、小结57

参考文献57

第四节 连接介导的PCR57

一、引言57

三、材料58

二、原理58

四、操作步骤59

五、注意事项61

六、应用62

七、小结65

参考文献65

第四章　扩增未知DNA序列的PCR66

第一节 差异显示PCR66

一、引言66

二、原理66

三、方法67

四、应用71

五、小结73

参考文献74

三、材料与方法75

二、基本原理75

第二节 限制性显示PCR75

一、引言75

四、注意事项78

五、应用79

六、小结80

参考文献80

第三节 消减PCR80

一、引言80

二、原理81

三、材料82

四、方法83

五、应用85

一、引言86

第四节 简并PCR86

参考文献86

六、小结86

二、原理87

三、材料87

四、方法87

五、注意事项90

六、应用91

七、小结93

参考文献94

第五节　Alu-PCR95

一、引言95

二、原理96

三、材料96

四、方法96

五、注意事项99

六、应用100

七、小结103

参考文献103

第六节 外显子捕获PCR104

一、引言104

二、原理104

三、内部外显子捕获的方法106

四、3′端外显子捕获的方法111

五、注意事项112

六、应用112

七、小结113

参考文献113

第五章　致突变PCR115

三、材料与方法116

二、原理116

一、引言116

第一节 随机错误掺入构建突变体库116

四、注意事项117

五、讨论117

第二节 构建定点突变序列或重组序列118

一、引言118

二、原理118

三、重叠延伸PCR构建定点突变体121

四、重组PCR构建定点突变质粒123

五、大引物PCR构建定点突变体123

六、注意事项124

七、讨论124

第三节 排除野生型DNA的定点突变PCR125

一、引言125

二、原理125

三、材料与方法126

四、注意事项128

五、讨论128

参考文献130

第六章　定量PCR131

第一节　定量PCR131

一、引言131

二、原理132

三、方法138

四、应用139

参考文献139

第二节 实时PCR139

一、引言139

二、原理140

三、荧光标记与探针类型141

四、相对定量和标准曲线定量145

五、引物设计146

六、污染的预防和热启动148

七、实时Q-PCR实验148

八、实时反转录PCR（实时RT-PCR）152

九、实时PCR的局限性157

参考文献157

第三节 竞争性PCR159

一、引言159

二、原理159

三、方法163

四、应用166

五、小结169

参考文献169

三、材料和方法171

二、原理171

第四节 内部控制的病毒粒子PCR171

一、引言171

四、注意事项173

五、应用173

六、小结173

参考文献173

第七章　免疫PCR174

第一节 免疫PCR174

一、引言174

二、原理174

三、材料和试剂176

四、方法177

五、应用178

第二节 免疫捕捉PCR181

一、引言181

参考文献181

六、小结181

二、基本原理182

三、材料182

四、方法183

五、注意事项185

六、应用185

七、小结187

参考文献187

第三节 PCR-ELISA188

一、引言188

二、原理189

三、材料190

四、方法190

六、应用191

五、注意事项191

七、小结194

参考文献194

第四节 原位PCR194

一、引言194

二、基本原理195

三、原位PCR方法分类及其设计方案195

四、原位PCR基本步骤197

五、原位PCR方法的选择199

六、原位PCR操作注意事项200

七、原位PCR存在的问题和结果分析201

八、原位PCR的应用202

九、原位PCR操作程序示例203

十、小结206

参考文献206

三、方法207

二、基本原理207

第八章　重组和表达PCR207

一、引言207

第一节 重组PCR207

四、应用209

五、小结213

参考文献213

第二节 不依赖连接反应的克隆PCR214

一、引言214

二、基本原理214

三、材料216

四、方法217

五、注意事项217

六、应用217

参考文献219

三、融合PCR的具体操作步骤220

二、融合PCR的原理220

第三节 融合PCR220

一、引言220

四、融合PCR的应用221

五、融合PCR操作方法的注意事项224

六、结语225

参考文献225

第四节　表达PCR226

一、引言226

二、基本原理226

三、材料227

四、方法227

五、应用229

参考文献229

一、使用增强剂改善高GC含量DNA模板的PCR扩增231

第一节 高GC含量DNA的PCR扩增231

第九章　其他PCR方法231

二、NaOH对模板进行预处理改善高GC含量DNA的PCR扩增235

三、利用高温PCR体系改善高GC含量DNA模板的PCR扩增236

四、应用237

五、小结237

参考文献238

第二节　长片段PCR238

一、引言238

二、原理239

三、材料239

四、方法240

五、注意事项241

六、应用243

第三节 不对称PCR245

一、引言245

七、小结245

参考文献245

二、引物浓度不对称PCR246

三、热（引物长度）不对称PCR248

四、应用252

五、小结253

参考文献253

第四节 降落PCR254

一、引言254

二、原理254

三、材料254

四、方法255

五、降落PCR与常规PCR的比较255

六、应用257

七、小结257

二、原理258

一、引言258

参考文献258

第五节 巢式PCR258

三、材料259

四、方法259

五、注意事项260

六、应用260

七、小结260

参考文献260

第十章　PCR在基因分型中的应用261

第一节　任意引物PCR261

一、引言261

二、任意引物PCR的基本原理及技术特点261

三、AP-PCR方法262

四、RAP-PCR方法263

六、应用264

五、注意事项264

七、小结268

参考文献268

第二节　广谱PCR269

一、广谱PCR简介269

二、广谱PCR模板制备方法271

三、引物设计272

四、应用举例——HPV广谱PCR检测275

参考文献276

第三节 共同区PCR278

一、引言278

二、基本原理278

三、材料279

四、方法280

六、应用282

五、注意事项282

七、小结284

参考文献284

第四节 两对交叉引物PCR285

一、引言285

二、基本原理286

三、材料286

四、方法286

五、注意事项287

六、应用287

七、小结287

参考文献287

第五节 REP-PCR288

一、引言288

二、基本原理288

四、方法289

三、材料289

五、注意事项290

六、应用291

七、小结293

参考文献293

第六节 稀有限制性位点PCR294

一、引言294

二、原理295

三、材料297

四、方法297

五、注意事项298

六、应用298

七、小结299

参考文献299

二、基本原理300

三、应用300

一、引言300

第七节 序列特异性引物PCR300

四、注意事项303

五、在其他方面的应用304

六、小结305

参考文献305

第八节 简单序列重复区间PCR306

一、引言306

二、原理306

三、材料306

四、方法307

五、注意事项308

六、应用308

参考文献309

七、小结309

第十一章　PCR在法医学中的应用310

第一节 短串联重复序列的PCR310

一、引言310

二、原理311

三、材料312

四、方法312

五、注意事项316

六、应用316

七、小结317

参考文献318

第二节 小卫星可重复序列PCR319

一、引言319

二、原理319

三、方法320

四、应用323

五、小结324

参考文献325

第三节 全基因组PCR326

一、引言326

二、全基因组PCR的种类326

三、基因组DNA模板的制备331

四、不同WGA方法的比较331

五、WGA的产物分析及应用332

六、小结334

参考文献334

三、方法336

一、引言336

二、原理336

第一节 多重PCR336

第十二章　PCR在遗传病诊断中的应用336

四、应用339

五、小结342

参考文献342

第二节 等位基因特异PCR343

一、引言343

二、原理344

三、材料345

四、方法345

五、注意事项345

六、对等位基因特异PCR的改进346

七、应用346

参考文献347

八、小结347

第三节　缺口PCR348

一、引言348

二、基本原理348

三、材料349

四、操作步骤349

五、注意事项350

六、应用350

七、小结350

参考文献350

第十三章　PCR在癌症诊断中的应用352

第一节 BCR-ABL PCR352

一、引言352

二、应用354

三、小结359

参考文献360

一、引言361

第二节 锅柄式PCR361

二、原理362

三、材料362

四、操作步骤362

五、应用365

参考文献365

第三节 杂合性缺失PCR367

一、引言367

二、基本原理367

三、材料367

四、方法368

五、注意事项368

六、应用369

二、基本原理370

一、引言370

第四节 单细胞PCR370

参考文献370

七、小结370

三、材料和方法371

四、注意事项375

五、应用375

六、小结376

参考文献376

第十四章　PCR与其他方法联合应用378

第一节 限制性片段长度多态性PCR378

一、原理378

二、材料378

三、操作方法379

四、注意事项380

五、应用380

一、原理381

第二节　PCR偶联连接酶链式反应381

二、材料382

三、方法383

四、注意事项384

五、应用385

第三节　PCR-单链构象多态性386

一、原理386

二、材料386

三、方法387

四、注意事项388

五、应用390

第四节　PCR-变性梯度凝胶电泳390

一、原理390

二、材料391

三、操作方法391

五、应用393

四、注意事项393

第五节 序列特异性寡核苷酸多态性PCR394

一、原理394

二、试剂394

三、方法395

四、注意事项399

五、应用399

第六节　PCR测序法400

一、直接测序法400

二、循环测序方法401

三、全自动DNA测序403

四、应用404

参考文献405

索引407