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第一章 临床分子生物检验学概论1

第一节 临床分子生物学检验基本概念1

一、临床分子生物学检验的概念1

二、临床分子生物学检验的学科发展史2

三、临床分子生物学检验在临床医学中的应用3

四、临床分子生物学检验的应用前景5

第二节 基因及基因组6

一、基因、基因组和基因组学基本概念6

二、病毒基因组7

三、原核生物基因组9

四、真核生物基因组11

五、人类基因组与人类基因组计划14

第三节 蛋白质组学17

一、蛋白质组学基本概念及其研究特点17

二、蛋白质组学研究的内容及相关技术19

三、蛋白质组学在医学中的应用22

第四节 生物信息学23

一、生物信息学概论23

二、生物信息学数据库24

三、生物信息学所用的方法和技术29

第二章 核酸检测技术31

第一节 核酸分离与纯化31

一、核酸分离纯化的基本原则与步骤31

二、DNA的分离纯化35

三、RNA的分离纯化46

第二节 核酸扩增49

一、聚合酶链反应50

二、PCR衍生技术55

三、实时荧光定量PCR59

四、数字化聚合酶链反应技术65

五、其他核酸体外扩增技术66

六、核酸扩增实验室管理规范与质量控制69

第三节 核酸分子杂交72

一、核酸分子杂交的基本概念与原理72

二、核酸探针75

三、核酸分子杂交技术及应用84

第四节 核酸测序90

一、核酸测序技术概述90

二、链终止法测序91

三、焦磷酸测序97

四、第二代核酸测序技术100

五、第三代核酸测序技术109

第三章 蛋白质检测技术114

第一节 双向电泳技术114

一、双向聚丙烯酰胺凝胶电泳概述114

二、双向聚丙烯酰胺凝胶电泳主要实验流程115

三、双向电泳技术的优缺点121

四、双向电泳技术的应用122

第二节 生物质谱技术123

一、质谱技术基本原理123

二、质谱仪基本结构123

三、常见生物质谱离子源126

四、与生物质谱联用的分离技术127

五、生物质谱技术在蛋白质组学中的应用128

第四章 生物芯片与生物传感技术132

第一节 基因芯片132

一、基因芯片的发展历史和检测原理132

二、基因芯片制备和检测133

三、基因芯片在临床和科研工作中的应用139

第二节 蛋白质芯片143

一、蛋白质芯片概述143

二、蛋白质芯片分类146

三、蛋白质芯片的制备及检测流程150

四、蛋白质芯片技术在医学分子检验中的临床应用151

第三节 生物传感器153

一、生物传感器概述153

二、常见生物传感器154

第五章 分子生物学诊断技术的临床应用162

第一节 感染性疾病的分子诊断162

一、概述162

二、病毒感染性疾病的分子诊断162

三、细菌感染性疾病的分子诊断177

四、其他感染性疾病的分子诊断184

五、实验室生物安全186

第二节 遗传性疾病的分子诊断188

一、单基因遗传病的分子诊断188

二、多基因遗传病的分子诊断195

三、出生缺陷与产前分子诊断199

四、线粒体病的分子诊断205

第三节 肿瘤的分子生物学检验208

一、概述208

二、肿瘤标志物209

三、肿瘤的分子生物学检验策略与方法218

四、常见肿瘤的分子生物学检验219

五、分子生物学检验技术与肿瘤的个体化医疗222

六、肿瘤分子生物学检验的展望223

第四节 分子生物学技术在其他领域的应用223

一、分子生物学技术在原发性高血压诊断中的应用223

二、分子生物学技术在细菌耐药基因检测中的应用225

三、分子生物学技术在器官移植中的应用228

四、分子生物学技术在法医鉴定中的应用230

第六章 临床分子生物学实验234

实验1人体外周血细胞基因组DNA的分离与纯化234

实验2人体外周血细胞RNA的分离与纯化236

实验3质粒DNA的分离与纯化238

实验4紫外-可见分子吸收光谱法检测核酸浓度和纯度241

实验5琼脂凝胶电泳分离DNA243

实验6常规PCR检测方法245

实验7 RT-PCR常规检测方法249

实验8 DNA限制性片段长度多态性实验252

实验9 Northern杂交技术256

实验10蛋白质免疫印迹技术259

实验11 HBV DNA实时荧光定量PCR检测263

汉英名词对照索引266