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目录1

第一章 实验数据的分析和报告1

1.1 实验数据的记录和处理1

1.1.1 有效数字1

1.1.2 科学记数法2

1.1.3 单位2

1.2 实验数据的分析4

1.2.1 误差分析和精密度的判断4

1.2.2 误差和数据的取舍5

1.2.3 数学运算结果的不确定性的计算5

1.2.4 精密度和测定次数之间的关系6

1.3 表和图6

1.3.1 表6

1.3.2 图表中10的乘方的使用7

1.3.3 制图规则8

1.3.4 线性化9

1.3.5 数值曲线拟合 最小二乘法10

1.3.6 线性最小二乘法中的权重因子11

1.3.7 曲线下面积的计算11

1.4 对照和空白11

1.5 命名的一般规则12

1.6 实验室和研究报告12

1.7 引用的文献13

1.8 深人研究用的参考文献13

第二章 溶液的制备和性质14

2.1 测量方法14

2.2　容量玻璃仪器14

2.3　容量玻璃仪器的使用17

2.3.1　清洗17

2.3.2　弯月面的读法17

2.3.3　校准17

2.4　分析天平18

2.5　浓度和稀释度的表达法19

2.6　溶液的稀释20

2.7　标准溶液20

2.8　 pH和缓冲溶液21

2.8.1　pH21

2.8.2　缓冲溶液22

2.8.3　缓冲液容量和离子强度23

2.9　pH测量24

2.9.1　PH计24

2.9.2　测定pH25

2.10 引用的文献25

2.11 深入研究用的参考文献25

第三章　光谱学方法26

3.1　电磁辐射和光谱26

3.2　光吸收的定量28

3.2.1　Lambert-Beer定律28

3.2.4 消光系数和浓度的测定29

3.2.3 物质的紫外或可见光谱和最大吸收波长的测定29

3.2.2 消光系数的定义29

3.2.5 混合物中两种物质浓度的测定31

3.2.6 差示光谱法32

3.3 紫外和可见光谱测定法32

3.3.1 仪器32

3.3.2 紫外和可见光谱的应用33

3.4 荧光光度法33

3.4.1 荧光33

3.4.2 仪器33

3.5 红外光谱学36

3.5.1 红外分光光度法36

3.5.2 红外分光光度计37

3.5.3 样品处理（用于红外光谱测定）38

3.5.4 红外光谱的应用38

3.6 核磁共振光谱测定法39

3.6.1 质子NMR光谱测定法41

3.6.2 13C NMR光谱测定法43

3.6.3 其它核的NMR光谱44

3.6.4 NMR光谱在生物化学中的应用45

3.7 引用的文献46

3.8 深入研究用的参考文献47

第四章 层析技术48

第一部分 层析类型和层析技术48

4.1 吸附层析49

4.2 离子交换层析51

4.3 液-液分配层析53

4.4 纸层析53

4.5 薄层层析56

4.6 凝胶渗透层析57

4.6.1 凝胶和柱的制备61

4.6.2 凝胶渗透层析中的概念62

4.7 亲和层析62

4.7.2 配体与固性载体的连接63

4.7.1 惰性载体和配体63

4.7.3 疏水层析64

4.8 气-液层析64

4.9 高效液相层析66

第二部 分层析的特殊应用69

4.10 糖类69

4.10.1 糖类的吸附层析69

4.10.2 糖类的离子交换层析69

4.10.3 糖类的纸层析70

4.10.4 糖类的薄层层析71

4.10.5 糖类的凝胶渗透层析72

4.10.6 糖类的亲和层析73

4.10.7 糖类的气-液层析73

4.10.8 糖类的高效液相层析73

4.11 氨基酸73

4.11.1 氨基酸的离子交换层析74

4.11.2 氨基酸的薄层层析75

4.12.1 蛋白质的吸附层析76

4.11.3 氨基酸的高效液相层析76

4.12 蛋白质76

4.12.2 蛋白质的离子交换层析77

4.12.3 蛋白质的凝胶渗透层析78

4.12.4 蛋白质的高效液相层析78

4.13 核苷酸和核酸78

4.13.1 核酸的离子交换层析78

4.13.2 核酸的凝胶渗透层析79

4.13.3 核酸的亲和层析79

4.13.4 核酸的高效液相层析80

4.14　脂类80

4.14.1 脂类的吸附层析80

4.14.2 脂类的离子交换层析80

4.14.3 脂类的纸层析80

4.14.4 脂类的薄层层析80

4.14.6 脂类的高效液相层析81

4.14.5 脂类的气-液层析81

4.15 引用的文献82

4.16 深入研究用的参考文献85

第五章 电泳技术86

5.1 理论86

5.2 电泳类型86

5.2.1 纸电泳和醋酸纤维素电泳87

5.2.3 凝胶电泳88

5.2.2 薄层电泳88

5.2.4 免疫电泳97

5.2.5 等电聚焦99

5.3 特殊应用99

5.3.1 蛋白质和肽99

5.3.2 核酸和寡核苷酸100

5.3.3 脂蛋白分离102

5.4 引用的文献102

5.5 深入研究用的参考文献103

6.1 原子 同位素和放射性同位素的本质104

第六章 放射性同位素的理论、测量和使用104

6.2 放射性衰变的类型105

6.2.1 负-β（电子）发射引起的衰变105

6.2.2 正-β（电子）发射引起的衰变105

6.2.3 捕获电子引起的衰变105

6.2.4 γ-辐射引起的衰变105

6.2.5 α-粒子发射引起的衰变106

6.3 天然放射性同位素和人工生产的放射性同位素106

6.4 放射性发射的性质107

6.4.1 β-粒子发射的能量107

6.4.2 β-粒子与其环境的相互作用108

6.4.3 γ辐射及其与物质的相互作用108

6.4.4 放射性衰变的动力学109

6.6 处理放射性同位素的特殊技术和安全措施112

6.5.2 居里：放射性蜕变的单位112

6.5.1 电子伏特112

6.5 放射性测量中使用的单位112

6.7 放射性同位素计数的统计学113

6.8 气体电离法测定放射性115

6.9 闪烁计数法测定放射性强度117

6.9.1 液体闪烁计数法的原理117

6.9.2 脉冲高分析和β能谱118

6.9.3 在双标记混合物中每种同位素活力的测定119

6.9.4 合剂组成和样品制备120

6.9.5 淬灭和淬灭校正121

6.10 γ-辐射的固体闪烁计数122

6.11 用放射自显影术检测123

6.12 标记生化物化学化合物的方法125

6.13 放射性化学标记的类型128

6.14 放射性同位素的应用129

6.14.1 用放射性同位素定量测定化合物的含量129

6.14.2 用同位素稀释分析法定量测定化合物130

614.4 应用放射性同位素的脉冲技术和追逐技术132

6.14.3 测定由一种标记前体形成的几种化合物的摩尔分数132

6.14.5 放射性示踪剂在酶反应机制和代谢途径研究中的应用133

6.14.6 放射免疫分析134

6.15 放射性同位素实验的设计135

6.16 引用的文献137

6.17 深入研究用的参考文献137

7.1 糖类138

7.1.1 各类型糖的定性检验138

第七章 定性定量测定生物分子的方法138

7.1.2 糖类的定量测定140

7.2 氨基酸肽和蛋白质145

7.2.1 氨基酸和蛋白质的定性试验145

7.2.2 氨基酸的定量测定146

7.2.3 蛋白质的定量测定148

7.3 核苷酸和核酸153

7.3.1 RNA和DNA的定性测定153

7.3.2 核苷酸和核酸的定量测定154

7.4.1 脂类在薄层层析图谱上的定性试验155

7.4 脂类和类固醇155

7.4.2 类固醇的定性试验157

7.4.3 脂类的定量测定157

7.5 其它测定方法158

7.5.1 无机磷的测定：修改的Fiskc-Subbarow法158

7.5.2 特殊键合分析158

7.6 引用的文献160

7.7 深入研究用的参考文献162

第八章 生物制备163

8.1 起始材料163

8.2 细胞溶解和抽提163

8.3 制备生物材料的特殊技术164

8.3.1 离心164

8.3.2 密度梯度离心166

8.3.3 过滤166

8.3.4 溶液的浓缩167

8.3.5　透析167

8.3.6　用于生产生化物质的细菌培养168

8.4　细胞成分和细胞器的亚细胞分级169

8.4.1　肝线粒体的制备169

8.4.2　叶绿体的制备169

8.4.3　肝核的分离169

8.4.4　大肠杆菌核糖体的制备170

8.5　蛋白质的纯化170

8.5.1　根据溶解度的分离170

8.5.3　蛋白质的结晶171

8.5.2　层析分离和电泳分离171

8.5.4　个别蛋白质的分离和纯化172

8.6　糖类的制备175

8.6.1　一般分离纯化方法175

8.6.2　制备不同糖类的特殊方法175

8.7　核酸的制备177

8.7.1　一般分离纯化方法177

8.7.2　制备各种核酸的特殊方法178

8.8.1　一般分离纯化方法180

8.8　脂类的制备180

8.8.2　一般抽提纯化步骤181

8.8.3　制备脂类的特殊方法181

8.9　引用的文献184

8.10　深入研究用的参考文献185

第九章 酶学186

9.1　酶作用的动力学和理论187

9.2　反应初速度v1的测定188

9.3 酶反应与pH的关系189

9.4 酶反应与温度的关系189

9.5 酶活力的测定190

9.6 酶的米氏常数Km最大反应速度Vm和转换数k2的测定192

9.7 酶的抑制作用195

9.7.1 竞争性抑制作用195

9.7.2 非竞争性抑制作用196

9.7.3 混合抑制作用197

9.7.4 反竞争性抑制作用198

9.8 不遵循米氏动力学的别构酶200

9.9 酶的专一性201

9.10 引用的文献201

9.11 深入研究用的参考文献202

第十章 生物分子的结构分析203

10.1 寡糖和多糖的结构测定203

10.1.1 单糖组成的测定204

10.1.2 寡糖结构的测定204

10.1.3 多糖结构的测定210

10.2 肽和蛋白质的一级结构测定213

10.2.1 多肽链的形成和分离213

10.2.2 蛋白质纯度的测定213

10.2.3 氨基酸组成测定214

10.2.4 末端分析214

10.2.5 肽键裂解的特殊方法216

10.2.7 肽的顺序分析218

10.2.6 肽的分离218

10.2.8 由重叠肽导出蛋白质的完整顺序221

10.3 核酸结构的测定221

10.3.1 DNA的分离纯化和克隆222

10.3.2 DNA的酶法裂解和限制性内切酶裂解图谱223

10.3.3 DNA的电泳分离及纯度鉴定225

10.3.4 顺序分析的战略225

10.4 脂类结构的测定234

10.3.5 大核酸完整顺序的导出234

10.4.1 脂类专一裂解成它的组成部分236

10.4.2 脂成分的测定236

10.4.3 蛋黄磷脂酰胆碱的鉴定——一个分析脂的例子238

10.5 引用的文献240

附录A：生化分析、生化方法和生化制备的文献资料来源242

附录B：氨基酸、缩写和DNA三联码244

附录C：某些市售限制性核酸内切酶及其DNA顺序专一性245

附录D：制备不同浓度硫铵溶液用表246

常用生物化学物质俗名缩写247